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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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wpf520

金虫 (正式写手)

[求助] 求助 为什么跑WB 我的总AMPK一直不一样 已有1人参与

6孔板细胞数差不多,经过蛋白定量,为何总AMPK一直跑不齐?求大神解答
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No.pain,No.gain!
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爱拼小侠女

新虫 (初入文坛)

你好,看到你也做AMPK的WB实验,很想咨询,跑SDS-PAGE时候最好配制多大浓度的胶,谢谢
永远有梦想永远勇敢追
6楼2015-10-26 11:05:18
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evangelina

无虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果不觉得麻烦,你根据跑出来的结果微调蛋白量,重新再跑一次胶不就好了

如果样本有限,那你就应该改良蛋白定量的方法,例如换成 Bradford Lowry 之类的就比280要准确
2楼2015-08-31 10:39:10
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wpf520

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by evangelina at 2015-08-31 10:39:10
如果不觉得麻烦,你根据跑出来的结果微调蛋白量,重新再跑一次胶不就好了

如果样本有限,那你就应该改良蛋白定量的方法,例如换成 Bradford Lowry 之类的就比280要准确

actin很齐,怎么回事?😊

[ 发自小木虫客户端 ]
No.pain,No.gain!
3楼2015-08-31 11:08:05
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evangelina

无虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
wpf520: 金币+25, 有帮助 2015-08-31 14:04:06
那你的总AMPK是不是做过磷酸化AMPK后做的,会不会是膜没有洗干净,还有磷酸化的信号残留在上面?

假如都不是,说不定总AMPK的量就真是不一样,也算一种发现
4楼2015-08-31 11:53:37
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