| 查看: 3110 | 回复: 18 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
大肠杆菌培养出现严重问题，紧急求助 已有8人参与
|
||
|
最近实验室摇菌出现下列问题，不知道是否为噬菌体，希望有经验的诸位能够给出一些建议。 1. 在相同的培养箱当中，同时进行小管摇菌，一些管子明显不生长，或生长缓慢。培养基相同，抗生素相同，单菌落来自用已确定序列的质粒转化的BL21。 2. 在相同培养条件下，进行200-1 L培养时，初期生长没有问题。OD达到0.45-0.8左右进行诱导。平行3或4瓶时会出现一瓶16度24小时OD只到0.9左右，或OD到2或3但收菌时上清有絮状物浮沫。所有培养基、瓶子都已灭菌，IPTG已用.22微米滤膜过滤，取样测OD时同时在开放环境或超净台中取样于离心管中。 3. 采用TB表达时，5000g以下转速收集的菌体呈现偏绿褐色的豆腐渣状态，无法集中在瓶底，而且明显OD值很低。已知实验室相同菌株在相同条件下表达，菌体会呈现黄色或淡红褐色状态。 上述情况在多瓶或多管表达时尤其明显，但并非是所有样品都会出现上述情况。而且所有大量表达的实验在诱导前生长状态良好，似乎不是菌株自带污染。 希望大家能提供一些经验，谢谢！ |
回复此楼» 猜你喜欢
材料求调剂 一志愿哈工大总分298分，前三科223分
已经有5人回复
-
085600 286分 材料求调剂
已经有6人回复
-
086502化学工程342求调剂
已经有4人回复
-
材料求调剂一志愿哈工大324
已经有7人回复
-
328求调剂
已经有7人回复
-
340求调剂
已经有5人回复
-
一志愿南昌大学324求调剂
已经有4人回复
-
求调剂推荐 材料 304
已经有15人回复
-
291求调剂
已经有19人回复
-
331环境科学与工程求调剂
已经有3人回复
19楼2017-09-13 21:23:33
hajierlove
铜虫 (正式写手)
- 应助: 44 (小学生)
- 金币: 197.8
- 散金: 130
- 红花: 15
- 沙发: 1
- 帖子: 427
- 在线: 175.7小时
- 虫号: 2346230
- 注册: 2013-03-14
- 性别: MM
- 专业: 生态学
2楼2015-08-21 23:00:53
huangxin2011 
捐助贵宾 (小有名气)
- 应助: 65 (初中生)
- 金币: 2482.9
- 散金: 2176
- 红花: 7
- 帖子: 189
- 在线: 157.8小时
- 虫号: 1481126
- 注册: 2011-11-07
- 专业: 纳米医学
3楼2015-08-22 10:58:29
4楼2015-08-22 15:42:57
10