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[求助]
大肠杆菌培养出现严重问题，紧急求助 已有8人参与
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最近实验室摇菌出现下列问题，不知道是否为噬菌体，希望有经验的诸位能够给出一些建议。 1. 在相同的培养箱当中，同时进行小管摇菌，一些管子明显不生长，或生长缓慢。培养基相同，抗生素相同，单菌落来自用已确定序列的质粒转化的BL21。 2. 在相同培养条件下，进行200-1 L培养时，初期生长没有问题。OD达到0.45-0.8左右进行诱导。平行3或4瓶时会出现一瓶16度24小时OD只到0.9左右，或OD到2或3但收菌时上清有絮状物浮沫。所有培养基、瓶子都已灭菌，IPTG已用.22微米滤膜过滤，取样测OD时同时在开放环境或超净台中取样于离心管中。 3. 采用TB表达时，5000g以下转速收集的菌体呈现偏绿褐色的豆腐渣状态，无法集中在瓶底，而且明显OD值很低。已知实验室相同菌株在相同条件下表达，菌体会呈现黄色或淡红褐色状态。 上述情况在多瓶或多管表达时尤其明显，但并非是所有样品都会出现上述情况。而且所有大量表达的实验在诱导前生长状态良好，似乎不是菌株自带污染。 希望大家能提供一些经验，谢谢！ |
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19楼2017-09-13 21:23:33
hajierlove
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huangxin2011 
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