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董文娟

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】DNA在点样孔中跑不出来 为什么?急急急急。。。。(基本解决,谢谢大家)

在进行菌液PCR后进行电泳,点样孔中有亮带,应该是DNA吧? 为什么跑不下来?电压用的是200V
胶最下面有小的DNA,估计是引物二聚体。

[ Last edited by 董文娟 on 2008-8-30 at 16:47 ]
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lybio

金虫 (正式写手)

菌液PCR啊,除了PCR仪95℃,5min,之前有没有用沸水浴煮5min?如果没的话,多加这步试试
14楼2008-08-23 16:14:16
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查看全部 22 个回答

glilyq

银虫 (正式写手)

★ ★
xyklmu(金币+2,VIP+0):感谢答复
是不是模板加多了?
我之前也遇到过这种情况,后来将体系加大,就没有了。具体也不没有得出什么原因。呵呵,分子试验,有时候说不明白。我当时也查了很多资料,也没有找到一个圆满的说法。你可以尝试将体系加大,模板量控制一下,少一点,试一试。还有循环数菌液PCR只需25个就够了。

[ Last edited by glilyq on 2008-8-20 at 22:14 ]
让梦想不断向前!
2楼2008-08-20 22:05:47
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zerozhang


xyklmu(金币+1,VIP+0):感谢答复,积极交流
我认为是菌体没有被破坏,DNA没有溢出,比如酵母菌的壁就较厚只煮一下恐怕不行。
4楼2008-08-21 16:51:58
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weigh1111

铁杆木虫 (正式写手)

点样孔中的应该不是DNA啊
6楼2008-08-21 21:01:18
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