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star97lx

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[交流] 关于NF-KB p65做的western blot结果

不知道大家在用wb检测细胞核蛋白NF-KB，用的p65抗体的时候有没有遇到这种情况，本来应该是65KD大小的条带，曝光出来却是一百多。NF-KB应该是一个二聚体，一百多KD是不是就是因为二聚体没有打开？按理来说是不是蛋白质变性后二聚体就打开了？我是用PCR仪直接95℃5min变性的，这中间有什么问题吗？希望有大神或者懂的人能不吝赐教，着实有一点想不通。谢谢啦~

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1楼 2015-08-06 07:43:06

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star97lx

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引用回帖:

21楼: Originally posted by 673643401 at 2015-08-06 15:36:20
建议你做个阳性对照和阴性对照，在分析结果。...

暂时找不到这种蛋白，所以我准备将变性这一步重新来过试一下，更换了蛋白上样缓冲液，准备延长变性时间，如果还是不行就做个阳性对照看看，谢谢您的指点，万分感激！

22楼2015-08-06 16:08:26

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查看全部 34 个回答

假大空

★
star97lx(金币+1): 谢谢参与

4楼2015-08-06 08:01:37

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star97lx

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会不会是我买的上样缓冲液变质了？

5楼2015-08-06 08:22:26

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