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sadhappy

新虫 (正式写手)

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[求助] 定量PCR溶解曲线，这样是什么意思？附图已有2人参与

三个问题，
第一，溶解曲线开始抬得很高，什么意思？
第二，有2个目的基因的峰高低相差不少，低的可以用吗？
第三，峰前的小峰是有非特异扩增吗？

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1楼 2015-08-05 12:51:42

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高gaoeryang

银虫 (小有名气)

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专业: 生物化学

【答案】应助回帖

三个问题，
第一，溶解曲线开始抬得很高，说明起跳太早，建议降低模板浓度
第二，有2个目的基因的峰高低相差不少，低的可以用吗？只要峰的主抽一致，应该是可以用的
第三，峰前的小峰是有非特异扩增吗？答案是不一定。融解曲线不是单一峰最主要有以下几方面原因：引物特异性不好；引物被污染了；引物冻融次数太多；引物浓度太高(这时会有一个比较低的引物二聚体峰)。