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rattiwu

新虫 (初入文坛)

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[求助] 胶乳不稳定，抗体发生脱落，SOS求助！已有3人参与

偶联好的胶乳保存在37℃和室温都不稳定，检测发现是抗体发生了脱落，应该是保存Buffer不合适。我现有的保存Buffer: PBS，海藻糖 5%，PEG 6K 1%，Gly 1%，BSA 0.1%，NaCl 50mM，NaN3 0.1%，pH 6.0。
在此，请教一下胶乳领域的大神：（1）抗体发生脱落是不是和偶联效果也有关系？比如说抗体是通过物理吸附到微球上。
（2）现有的这个配方是不是有需要改进的地方？配制保存液时应该注意哪些问题？
稳定性的问题始终解决不了，搞得整个人都不好了。希望大神们能不吝赐教，多谢！

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1楼 2015-08-02 16:25:18

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rattiwu

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引用回帖:

5楼: Originally posted by youjihuaxue2000 at 2015-08-13 08:50:03
想请教一下：您是如何检测确定是抗体掉下来了？您提到的不稳定是指什么？检测结果掉值吗？还是试剂沉淀？抗体和微球的结合有2种方式：共价偶联和被动吸附。对于被动吸附，抗体和粒子结合，是一个动态的过程，即“吸 ...

将胶乳离心后取上清，跑PAGE电泳，发现胶乳在37℃存放的时间越长，上清中的抗体浓度越高，抗体条带的颜色深浅变化很明显（胶乳体积和加样量全部一致）。网上说影响胶乳稳定性的因素很多，但有不好逐一排除，事情确实有点棘手。