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胶乳不稳定，抗体发生脱落，SOS求助！ 已有3人参与
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偶联好的胶乳保存在37℃和室温都不稳定，检测发现是抗体发生了脱落，应该是保存Buffer不合适。我现有的保存Buffer: PBS，海藻糖 5%，PEG 6K 1%，Gly 1%，BSA 0.1%，NaCl 50mM，NaN3 0.1%，pH 6.0。 在此，请教一下胶乳领域的大神：（1）抗体发生脱落是不是和偶联效果也有关系？比如说抗体是通过物理吸附到微球上。 （2）现有的这个配方是不是有需要改进的地方？配制保存液时应该注意哪些问题？ 稳定性的问题始终解决不了，搞得整个人都不好了。希望大神们能不吝赐教，多谢！ |
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youjihuaxue2000
银虫 (小有名气)
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【答案】应助回帖
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想请教一下：您是如何检测确定是抗体掉下来了？您提到的不稳定是指什么？检测结果掉值吗？还是试剂沉淀？抗体和微球的结合有2种方式：共价偶联和被动吸附。对于被动吸附，抗体和粒子结合，是一个动态的过程，即“吸附——解吸附”，一旦体系中有其它蛋白，比如BSA，其某个区域疏水面积大于抗体和粒子结合区域的疏水面积，一旦抗体解吸附，杂蛋白就有可能竞争结合上去，赖在上面不走了，于是抗体就“掉下来”。个人感觉你的buffer不是主要原因。从上面的原理入手去解决试试。 可能说得不对，您参考一下。 欢迎交流，huxuhua2008@163.com [ 发自手机版 http://muchong.com/3g ] |
5楼2015-08-13 08:50:03
2楼2015-08-03 18:11:35
3楼2015-08-11 18:12:50
4楼2015-08-12 14:12:15
