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胶乳不稳定,抗体发生脱落,SOS求助! 已有3人参与
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偶联好的胶乳保存在37℃和室温都不稳定,检测发现是抗体发生了脱落,应该是保存Buffer不合适。我现有的保存Buffer: PBS,海藻糖 5%,PEG 6K 1%,Gly 1%,BSA 0.1%,NaCl 50mM,NaN3 0.1%,pH 6.0。 在此,请教一下胶乳领域的大神:(1)抗体发生脱落是不是和偶联效果也有关系?比如说抗体是通过物理吸附到微球上。 (2)现有的这个配方是不是有需要改进的地方?配制保存液时应该注意哪些问题? 稳定性的问题始终解决不了,搞得整个人都不好了。希望大神们能不吝赐教,多谢! |
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4楼2015-08-12 14:12:15
2楼2015-08-03 18:11:35
3楼2015-08-11 18:12:50
youjihuaxue2000
银虫 (小有名气)
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- 专业: 无机材料化学
【答案】应助回帖
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想请教一下:您是如何检测确定是抗体掉下来了?您提到的不稳定是指什么?检测结果掉值吗?还是试剂沉淀?抗体和微球的结合有2种方式:共价偶联和被动吸附。对于被动吸附,抗体和粒子结合,是一个动态的过程,即“吸附——解吸附”,一旦体系中有其它蛋白,比如BSA,其某个区域疏水面积大于抗体和粒子结合区域的疏水面积,一旦抗体解吸附,杂蛋白就有可能竞争结合上去,赖在上面不走了,于是抗体就“掉下来”。个人感觉你的buffer不是主要原因。从上面的原理入手去解决试试。 可能说得不对,您参考一下。 欢迎交流,huxuhua2008@163.com [ 发自手机版 http://muchong.com/3g ] |
5楼2015-08-13 08:50:03










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