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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 秀丽隐杆线虫同期化问题
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小猪向前冲oo

新虫 (小有名气)

[求助] 秀丽隐杆线虫同期化问题 已有2人参与

最近做了很多次秀丽隐杆线虫的同期化实验，全都失败了。原因主要是虫卵的孵化率很低，看着取出的虫卵个数还可以，但是过段时间孵化出的线虫数量极少，多数卵都消失啦。现在非常着急，求各位大神帮忙，这是什么原因造成的？（以前做同期化实验成功率很高的，所以可以确定方法应该没有问题，不知是不是哪些地方注意不到造成）
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1楼 2015-07-26 08:03:16
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若比邻211

新虫 (初入文坛)
我也在做同步化，总是没有虫子爬出来，不知道哪个环节出错了，求详细步骤！

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2楼2015-07-30 12:34:01
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lanjf

新虫 (初入文坛)
我们配方是 5M NaOH, NaClO,还有M9 buffer, 按1:1:8混匀即可，一般在5分钟左右搞定，不要太长时间，不然可能导致胚胎致死。
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3楼2015-08-05 18:50:30
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李梓_1205

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lanjf at 2015-08-05 18:50:30
我们配方是 5M NaOH, NaClO,还有M9 buffer, 按1:1:8混匀即可，一般在5分钟左右搞定，不要太长时间，不然可能导致胚胎致死。

请问您的次氯酸钠的浓度时多少
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热爱生活，珍惜人生！
4楼2015-09-17 21:00:20
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ypslly

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

应该是bleach过了，很多卵死了。bleach处理时间缩短试试,充分震荡。

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5楼2015-09-17 22:54:34
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一米浪浪

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lanjf at 2015-08-05 18:50:30
我们配方是 5M NaOH, NaClO,还有M9 buffer, 按1:1:8混匀即可，一般在5分钟左右搞定，不要太长时间，不然可能导致胚胎致死。

请问5M是5mol的意思吗？

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6楼2015-09-30 16:32:29
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sunflower_zY

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你是裂解虫体做的同期化是么？建议还是采用4h内成虫产卵，用M9冲走成虫留卵的做法。这样效果更好！
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7楼2016-03-09 16:24:52
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Tennie1015

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lanjf at 2015-08-05 18:50:30
我们配方是 5M NaOH, NaClO,还有M9 buffer, 按1:1:8混匀即可，一般在5分钟左右搞定，不要太长时间，不然可能导致胚胎致死。

你好，可以单独联系一下吗
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8楼2017-01-04 08:43:35
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