| 查看: 3783 | 回复: 11 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
njuzhangxin铁杆木虫 (小有名气)
|
[求助]
已知一个基因cDNA全长，6006 bp，想用高保真酶扩增出ORF区，一直扩增不出条带 已有6人参与
|
|
| 已通过race获得一个基因cDNA全长，6006 bp，想用高保真酶扩增出ORF区，一直扩增不出条带。引物没有问题，因为扩增基因组DNA，可以扩增出大约6k多的条带。所以我觉得是RNA反转录成cDNA模板的问题。也查了一下，6k确实太大，有人建议把6k分成几段去扩增，分别去连接转化。想请教一下，扩增大片段基因的ORF区，是否应该用能获得cDNA全长的试剂盒？普通的反转录试剂盒反转录出的cDNA是不是有可能在基因某个位置是断裂的？或者大家有没有比较好的反转录试剂盒可以推荐，谢谢赐教。 |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有214人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有6人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 已知一个基因通过转录组获得的cDNA序列，如何设计引物克隆这个基因
已经有19人回复
- 已知基因cDNA序列，如何确定基因全长
已经有7人回复
- 已知一个性状，如何确定控制它的基因？
已经有4人回复
- 克隆未知基因
已经有7人回复
- 设计了两对引物，但是结果不一样
已经有9人回复
- 恳请帮忙介绍研究多个基因家族可以采用的既省时又高效的方法
已经有3人回复
- 已知一个基因的DNA序列，怎么得到它的cDNA序列，我想做RT-PCR
已经有6人回复
- 转基因烟草DNA可以检测到目的条带，RNA反转录的CDNA进行检测不到目的条带
已经有4人回复
- cDNA扩增效率如何优化。
已经有26人回复
- cDNA扩增效率如何优化。
已经有1人回复
- 测序结果奇怪，求助
已经有6人回复
- 基因组PCR的问题
已经有3人回复
- 基因工程课程小结
已经有20人回复
- 请教如何找内含子，求教高手，急！！
已经有4人回复
- 请教高手--找同源基因的问题
已经有3人回复
- 转录组研究前沿
已经有21人回复
- 报告基因
已经有6人回复
- 现代药理学实验方法与技术简介
已经有105人回复
- 【求助/交流】如何从筛选cDNA文库？
已经有3人回复
- 【分享】生物信息学与功能基因组学
已经有26人回复
- 浙江大学2006年分子生物学考博
已经有8人回复
mm的毛毛
木虫 (正式写手)
科研毛毛虫
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 1650.1
- 红花: 4
- 帖子: 376
- 在线: 133.5小时
- 虫号: 861419
- 注册: 2009-10-01
- 性别: GG
- 专业: 生物信息学
7楼2015-07-27 09:52:35
wangpeng227
木虫 (小有名气)
- 应助: 68 (初中生)
- 金币: 1623.6
- 红花: 2
- 帖子: 270
- 在线: 148.2小时
- 虫号: 448896
- 注册: 2007-11-02
- 性别: GG
- 专业: 植物生理与生化
2楼2015-07-24 17:50:52
great07225388
新虫 (著名写手)
- 应助: 15 (小学生)
- 金币: 1510.3
- 散金: 3964
- 红花: 10
- 帖子: 1069
- 在线: 198.7小时
- 虫号: 1049207
- 注册: 2010-06-29
- 性别: GG
- 专业: 生物信息学
3楼2015-07-24 21:43:03
njuzhangxin
铁杆木虫 (小有名气)
- 应助: 12 (小学生)
- 金币: 6953.1
- 红花: 2
- 帖子: 175
- 在线: 101.6小时
- 虫号: 923947
- 注册: 2009-12-09
- 性别: GG
- 专业: 植物保护生物技术
4楼2015-07-25 22:39:02
