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iswearit

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by stone2239 at 2015-07-24 18:33:43
相差十几bp的两个序列分别是多大呢?序列本身比较大,那相差十几bp很难分开,但是如果序列本身只有100bp左右,用3%的胶还是有可能分开的。

都是200多bp 相差十几Bp
先得到的未必是好的
11楼2015-07-25 13:23:55
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iswearit

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by maomao21ke at 2015-07-24 11:16:41
这个要怎么搞?    会不会是弄错了     咱们用的那些marker最小的间隔都得相差100bp呢

有间隔50bp的marker
先得到的未必是好的
12楼2015-07-25 13:30:18
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
11楼: Originally posted by iswearit at 2015-07-25 13:23:55
都是200多bp 相差十几Bp...

这个你只能跑胶看了,估计不好区分。如果不想用PAGE,非要用琼脂糖凝胶,那试下PCR→酶切→琼脂糖凝胶电泳,就是看相差的部分是否有酶切位点变化,如果有,PCR结束后用相应的酶酶切后再跑电泳看结果。
13楼2015-07-25 15:56:38
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iswearit

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by stone2239 at 2015-07-24 18:33:43
相差十几bp的两个序列分别是多大呢?序列本身比较大,那相差十几bp很难分开,但是如果序列本身只有100bp左右,用3%的胶还是有可能分开的。

谢谢你的回复。我在文献看到配制PAGE凝胶的方法,最后一句是将凝胶轻轻地浸入用l xTBE溶液配制的溴化乙锭染液中,染液将凝胶全
部没住。于室温下染色20~30 min。我们的EB是用去离子水配的,可以代替文献说的TBE吗。
先得到的未必是好的
14楼2015-07-25 16:11:42
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
iswearit: 金币+3 2015-07-26 09:46:34
引用回帖:
14楼: Originally posted by iswearit at 2015-07-25 16:11:42
谢谢你的回复。我在文献看到配制PAGE凝胶的方法,最后一句是将凝胶轻轻地浸入用l xTBE溶液配制的溴化乙锭染液中,染液将凝胶全
部没住。于室温下染色20~30 min。我们的EB是用去离子水配的,可以代替文献说的TBE ...

只是染色用,应该是可以的。
15楼2015-07-25 16:46:56
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wangpeng227

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
3%的胶,分离100和120应该还是可以的,要做好对照
16楼2015-07-25 17:36:44
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iswearit

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
15楼: Originally posted by stone2239 at 2015-07-25 16:46:56
只是染色用,应该是可以的。...

用page胶的话 ,电压用多少啊,跑胶时间呢。谢谢
先得到的未必是好的
17楼2015-07-26 09:46:29
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vivd娟

金虫 (小有名气)

要用PAGE来跑
18楼2015-07-27 10:19:51
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
sds-聚丙烯酰胺凝胶可以区别
todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
19楼2015-07-27 17:53:35
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