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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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melani1983

铁虫 (初入文坛)

[求助] western blot 求助 已有8人参与

各位大神好!本人小博一名,最近做Western blot 转膜一直不稳定,market有时候也不清晰,转膜条件 230mA 恒流 100min,对应电压大概是110v左右,转膜液配方:配制1L转移缓冲液,需称取2.9g甘氨酸、5.8gTris碱、0.37g SDS,并加入200ml甲醇,加水至总量1L。提前预冷1个小时以上。附图一张,请大神指导。

western blot 求助
ACTIN-1.jpg
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lavender_li

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
13楼: Originally posted by melani1983 at 2015-07-25 15:48:48
我传的是膜孵育抗体后的图片,图上比较浓的部分是病毒过表达的条带。转膜之后的胶没有染过。谢谢...

把胶也染色一下看看是不是胶里面还有大量的蛋白质残留。也许是转膜有问题呢
15楼2015-07-27 10:24:10
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探花花

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
melani1983(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-07-24 10:21:34
感觉像是胶的问题。但是Marker也没有跑出来,有点诡异的感觉
相信什么才会得到什么
2楼2015-07-23 23:09:35
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uulovelyuu

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
melani1983(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-07-24 10:21:40
胶配的不好吧,不同样品之间有点串了。
3楼2015-07-24 09:29:18
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a86052

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
melani1983(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-07-24 10:21:49
蛋白分子量很大吗?个人觉得可以不用加SDS。转膜效果不好可能是你的buffer有些问题,可以调整下试试
4楼2015-07-24 09:44:29
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