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阿维victor

银虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by wuwuqaz at 2015-07-24 11:20:25
看到引物二聚体没?有的话,一般是模板的问题,没有就是PCR的问题

引物二聚体在紫外线下长啥样?(新手真的什么都不懂)

[ 发自小木虫客户端 ]
11楼2015-07-24 15:34:07
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阿维victor

银虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by hanbo87234 at 2015-07-24 13:46:02
给个照片看看呗,是目标带没跑出来还是都没出来哪?

都没出来。。。现在胶已经扔掉了。。没照片。。下次求助一定带照片。

[ 发自小木虫客户端 ]
12楼2015-07-24 15:36:02
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阿维victor

银虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by bfcherish at 2015-07-24 14:17:23
呃!老师说他也不知道

他说原因很多不知道哪个地方出问题了。

[ 发自小木虫客户端 ]
13楼2015-07-24 15:37:01
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wuwuqaz

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
11楼: Originally posted by 阿维victor at 2015-07-24 15:34:07
引物二聚体在紫外线下长啥样?(新手真的什么都不懂)
...

就是大概100bp左右的片段吧
14楼2015-07-25 11:05:18
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ly476779208

银虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
PCR需要注意的好像不太多,P不出来的原因也不太多的。既然你是新新手,作为一个新手我就说说我最近刚开始的实验好了。
PCR操作过程中:引物粉状先离心,再用ddw稀释到10uM。dNTP看要不要稀释。模板看要不要稀释。选择与酶对应的buffer。体系配制一般先mix一下再分装,不然取量太小不精确。最后是PCR程序设计。
P不出来的原因(如果不是电泳那边的问题,只看PCR过程的话):模板不纯/模板浓度问题;引物问题;PCR程序问题。
解决办法:论坛里面搜搜吧……每个都是一个专题!
做实验哦QAQ
15楼2015-08-05 16:54:34
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