应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 第一次跑PCR发现跑不出来。。
152/2返回列表上一页12
查看: 2019  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

阿维victor

银虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by wuwuqaz at 2015-07-24 11:20:25
看到引物二聚体没？有的话，一般是模板的问题，没有就是PCR的问题

引物二聚体在紫外线下长啥样？(新手真的什么都不懂)

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
11楼2015-07-24 15:34:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阿维victor

银虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by hanbo87234 at 2015-07-24 13:46:02
给个照片看看呗，是目标带没跑出来还是都没出来哪？

都没出来。。。现在胶已经扔掉了。。没照片。。下次求助一定带照片。

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
12楼2015-07-24 15:36:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阿维victor

银虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by bfcherish at 2015-07-24 14:17:23
呃!老师说他也不知道

他说原因很多不知道哪个地方出问题了。

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
13楼2015-07-24 15:37:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuwuqaz

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
11楼: Originally posted by 阿维victor at 2015-07-24 15:34:07
引物二聚体在紫外线下长啥样？(新手真的什么都不懂)
...

就是大概100bp左右的片段吧
赞一下 回复此楼
14楼2015-07-25 11:05:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ly476779208

银虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
PCR需要注意的好像不太多，P不出来的原因也不太多的。既然你是新新手，作为一个新手我就说说我最近刚开始的实验好了。
PCR操作过程中：引物粉状先离心，再用ddw稀释到10uM。dNTP看要不要稀释。模板看要不要稀释。选择与酶对应的buffer。体系配制一般先mix一下再分装，不然取量太小不精确。最后是PCR程序设计。
P不出来的原因（如果不是电泳那边的问题，只看PCR过程的话）：模板不纯/模板浓度问题；引物问题；PCR程序问题。
解决办法：论坛里面搜搜吧……每个都是一个专题！
赞一下(1人) 回复此楼
做实验哦QAQ
15楼2015-08-05 16:54:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 阿维victor 的主题更新
152/2返回列表上一页12
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭