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ylaxfyy木虫 (小有名气)
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[求助]
荧光染料/荧光探针荧光强度问题 已有3人参与
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| 请问各位大神，有谁合成过某些荧光染料，在体外测试时候荧光很弱，但是在细胞内测试时荧光特别强（共聚焦的激光开的很弱，大概2%），我想知道这是什么原因！这个染料有个碳碳双键的桥连，两边的基团可以自由旋转，他的温敏和黏度性质我都测试过，它随着温度的升高荧光减弱，随着溶剂粘度的增加，荧光增强，但是只是增强了大约5倍。是不是这个染料和某些特殊的蛋白作用了，导致了碳碳双键不能自由旋转而荧光增强？还有您觉得这个荧光染料性能好不好？ |
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在体外，由于双键的旋转，分子增加了非辐射越迁，导致光的淬灭，这与你的体外实验结果也相符，温度增加扭转速度增加，非辐射跃迁更加严重，而黏度增加恰恰限制了扭动。这一类带双键的分子，很多被用来测蛋白，原理就是它嵌插在蛋白里限制了其扭动，荧光明显增强，你在细胞中应该也是这个原因。 发自小木虫IOS客户端 |
14楼2016-11-02 09:20:09
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2楼2015-07-29 10:47:15
ylaxfyy
木虫 (小有名气)
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3楼2015-07-29 20:54:14
nickeyluan
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4楼2015-08-05 10:44:56