新买的DMEM培养基PH8.0左右正常吗？ - 生物科学 - 细胞科学

勤思好问

11楼2015-08-02 09:59:29

glorywinter

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7楼: Originally posted by siriusxuan at 2015-07-17 09:19:22
8.0细胞还没死说明命硬，换一家供应商吧。
PH7.2-7.4之间细胞才能长好，最好买固体粉末自己配。

有没有好的供应商推荐一下，我用的吉诺的。

勤思好问

12楼2015-08-02 10:00:18

sheepshowzz

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11楼: Originally posted by glorywinter at 2015-08-02 09:59:29
我是两天消化一次，然后传代培养，扔掉一半留一半，难道是太少了吗？...

接近90%才分細胞的嗎?
1:2算是留很多細胞了, 除非本?砭吞D
epithelial cell對細胞密度?M敏感的, 曾經太多過或太少過都可能造成它變得不健康.
如果細胞太少了, 2~3天細胞沒接近?M的話, 就換medium就可以.

細胞生長正常嗎?
如果型態跟之前差不多, 1:2~1:6可以2~3天?M, 只是Medium "兩天"沒變黃.
那問題應該不大, 因為你再放個幾天一定會變黃的...

abcdogbitepig

13楼2015-08-03 10:31:05

siriusxuan

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12楼: Originally posted by glorywinter at 2015-08-02 10:00:18
有没有好的供应商推荐一下，我用的吉诺的。...

Life technology的啊，很便宜的，不过实验室需要配备相应的过滤装置。

此座可言轻社稷，江山万里起风尘。

14楼2015-08-03 12:53:46

glorywinter

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13楼: Originally posted by sheepshowzz at 2015-08-03 10:31:05
接近90%才分細胞的嗎?
1:2算是留很多細胞了, 除非本?砭吞D
epithelial cell對細胞密度?M敏感的, 曾經太多過或太少過都可能造成它變得不健康.
如果細胞太少了, 2~3天細胞沒接近?M的話, 就換medium就可以.
...

1：2 1:6是什么比？细胞长得很慢，有时候基本不长。细胞形态也不对，不是那种梭形，总是几个抱团。你遇见过这种现象吗？

勤思好问

15楼2015-08-03 16:46:24

glorywinter

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14楼: Originally posted by siriusxuan at 2015-08-03 12:53:46
Life technology的啊，很便宜的，不过实验室需要配备相应的过滤装置。...

买回来还需要过滤吗？用几微米的的注射器滤头过滤行吗？

勤思好问

16楼2015-08-03 16:47:26

siriusxuan

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16楼: Originally posted by glorywinter at 2015-08-03 16:47:26
买回来还需要过滤吗？用几微米的的注射器滤头过滤行吗？...

不行，那样太慢了，一般都一次配2L的，有公司卖电动滤器的，可以购置些。

此座可言轻社稷，江山万里起风尘。

17楼2015-08-03 17:17:21

glorywinter

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17楼: Originally posted by siriusxuan at 2015-08-03 17:17:21
不行，那样太慢了，一般都一次配2L的，有公司卖电动滤器的，可以购置些。...

你说是配的培养基，不是买的？

勤思好问

18楼2015-08-03 17:53:40

sheepshowzz

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15楼: Originally posted by glorywinter at 2015-08-03 16:46:24
1：2 1:6是什么比？细胞长得很慢，有时候基本不长。细胞形态也不对，不是那种梭形，总是几个抱团。你遇见过这种现象吗？...

1:2就是留一半的意思, 1:6就是留1/6的意思.
一般cell line約24小時分裂一次, 當然也會有一些比較快或比較慢的.
通常第一天會長比較慢是正常, 因為細胞要貼壁,
第二~三天才會正常生長.

如果細胞型態不對了, 建議?G棄重新解凍過. 或跟別的�?驗室或學長姐分過一盤. 因為細胞狀況變差之後通常無法恢?�.
如果你是換了一批medium後細胞才變奇怪, 那你就要想一下處理上跟之前有哪裡不一樣?
買粉末泡的medium就要過濾0.22um filter, 買液體的話通常就是無菌的了.
另外有些細胞對血清會有些敏感, 所以�?買新的一批血清時最好先測試過手上的細胞是否能適應再買.
還有, 血清大多還是需要經過56度水域煮30分鐘, 有時候有些新手會忽略, 細胞就會長不好.
但現在市面上也有些號稱不需要加熱就可以使用的血清, 記得看一下產品說明.

abcdogbitepig

19楼2015-08-04 10:29:17

glorywinter

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19楼: Originally posted by sheepshowzz at 2015-08-04 10:29:17
1:2就是留一半的意思, 1:6就是留1/6的意思.
一般cell line約24小時分裂一次, 當然也會有一些比較快或比較慢的.
通常第一天會長比較慢是正常, 因為細胞要貼壁,
第二~三天才會正常生長.

如果細胞型態不對了, ...

谢谢你的帮助，非常感谢。

勤思好问

20楼2015-08-05 08:25:42