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coofir

铜虫 (初入文坛)

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[求助] 为什么酶切后的质粒比没有酶切的跑得远？已有3人参与

用NEB的酶对之前回收的条带进行酶切。37度水浴3小时后跑电泳，出现了图中的情况。点样孔分别为Marker，酶1，酶2，酶3，CK。一般来说酶切后环状质粒应该变为线状，跑的距离比没有切开的近，可是图中却是跑得更远。请问这是什么原因？图中的条带因为亮度太低我将它们调亮了些。

质粒求助.jpg

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1楼 2015-07-07 16:29:47

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王平阳

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【答案】应助回帖

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电泳跑得快慢与分子大小、分子形态、分子状态等相关，你所说的“一般来说酶切后环状质粒应该变为线状，跑的距离比没有切开的近”这种情况是指分子量大小相差不大的情况下，即酶切下的片段不大的情况下，但是当酶切释放的片段相对质粒本身比较大的时候，决定快慢的主要因素不再是分子形态（超螺旋和链状），而是分子大小，谢谢