24小时热门版块排行榜    

查看: 2637  |  回复: 23

hgschen

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 游侠892 at 2015-07-07 14:43:01
只要有变异,一般使用碱基错配的方式可以开发出标记。

关键是,具体该怎么操作?我多问问吧
11楼2015-07-07 15:09:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
10楼: Originally posted by hgschen at 2015-07-07 15:07:51
这是我用DNAMAN查找限制酶后截的图,好像确实没有对应的酶……希望不是我DNAMAN用错了……

限制性内切酶.jpg
...

具体哪个碱基发生了什么样的变化?
12楼2015-07-07 17:32:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hgschen

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
12楼: Originally posted by stone2239 at 2015-07-07 17:32:59
具体哪个碱基发生了什么样的变化?...

就是那个红色箭头指的碱基,另外我从文献截的图,野生型的以第三个为准。还有,能有你的QQ或其他什么联系方式么,以方便交流?谢谢了。
若两同源基因仅有一个碱基不同,有相关的分子标记技术将其区分开么?
区别.JPG


若两同源基因仅有一个碱基不同,有相关的分子标记技术将其区分开么?-1
限制性内切酶.jpg

13楼2015-07-07 19:57:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

的确没有酶切位点变化,那就按dCAPS的方法做。
14楼2015-07-07 21:05:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

游侠892

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
11楼: Originally posted by hgschen at 2015-07-07 15:09:32
关键是,具体该怎么操作?我多问问吧...

推荐你看一下“用等位基因特异PCR检测普通小麦的单核苷酸多态性”这篇文章你就可以知道怎么做了。
路漫漫其修远兮,吾将上下而求索
15楼2015-07-08 09:53:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hgschen

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
14楼: Originally posted by stone2239 at 2015-07-07 21:05:29
的确没有酶切位点变化,那就按dCAPS的方法做。

额,结果就是这样,所以,这大概是什么意思呢?
若两同源基因仅有一个碱基不同,有相关的分子标记技术将其区分开么?-2
dCAPS部分结果.png

16楼2015-07-08 16:17:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hgschen

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
14楼: Originally posted by stone2239 at 2015-07-07 21:05:29
的确没有酶切位点变化,那就按dCAPS的方法做。

问一下,那个dCAPS就是在引物上设酶切位点,但切下来也就20bp多点吧,产物一般400~1000多,缺了20bp,条带会有明显差异么?
17楼2015-07-12 17:05:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


hgschen(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-07-14 22:47:31
引用回帖:
17楼: Originally posted by hgschen at 2015-07-12 17:05:24
问一下,那个dCAPS就是在引物上设酶切位点,但切下来也就20bp多点吧,产物一般400~1000多,缺了20bp,条带会有明显差异么?...

dCAPS引物可以设计长点,40bp左右,产物长度200-300即可,酶切后用3-4%的胶跑电泳,多跑一会,是可以区分开的。
18楼2015-07-12 17:53:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hgschen

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
18楼: Originally posted by stone2239 at 2015-07-12 17:53:37
dCAPS引物可以设计长点,40bp左右,产物长度200-300即可,酶切后用3-4%的胶跑电泳,多跑一会,是可以区分开的。...

我用prime premier 5设计对应的引物,发现分值都比较低,有什么解决方法么?
19楼2015-07-14 10:36:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
19楼: Originally posted by hgschen at 2015-07-14 10:36:03
我用prime premier 5设计对应的引物,发现分值都比较低,有什么解决方法么?...

不用管那些,用dCAPS在线工具直接设计。
20楼2015-07-14 12:18:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 hgschen 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 301求调剂 +9 yy要上岸呀 2026-03-17 9/450 2026-03-18 08:58 by 无际的草原
[考研] 考研化学学硕调剂,一志愿985 +4 张vvvv 2026-03-15 6/300 2026-03-17 17:15 by ruiyingmiao
[考研] 290求调剂 +3 p asserby. 2026-03-15 4/200 2026-03-17 16:35 by wangkm
[考研] 08工科 320总分 求调剂 +4 梨花珞晚风 2026-03-17 4/200 2026-03-17 13:38 by houyaoxu
[考研] 考研调剂 +3 淇ya_~ 2026-03-17 5/250 2026-03-17 09:25 by Winj1e
[考研] 0703化学调剂 +6 妮妮ninicgb 2026-03-15 9/450 2026-03-16 16:40 by houyaoxu
[考研] 0703化学调剂 290分有科研经历,论文在投 +7 腻腻gk 2026-03-14 7/350 2026-03-16 10:12 by houyaoxu
[考研] 326求调剂 +3 mlpqaz03 2026-03-15 3/150 2026-03-16 07:33 by Iveryant
[考研] 中科大材料与化工319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:10 by ms629
[考研] 中科大材料专硕319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-13 3/150 2026-03-14 18:10 by houyaoxu
[考研] 297求调剂 +4 学海漂泊 2026-03-13 4/200 2026-03-14 11:51 by 热情沙漠
[考研] 266求调剂 +4 学员97LZgn 2026-03-13 4/200 2026-03-14 08:37 by zhukairuo
[考研] 0703,333分求调剂 一志愿郑州大学-物理化学 +3 李魔女斗篷 2026-03-11 3/150 2026-03-13 22:24 by JourneyLucky
[考研] 333求调剂 +3 球球古力 2026-03-11 3/150 2026-03-13 21:27 by JourneyLucky
[考研] 315求调剂 +9 小羊小羊_ 2026-03-11 10/500 2026-03-13 21:13 by SXNU李老师
[考研] 0703化学求调剂 +7 绿豆芹菜汤 2026-03-12 7/350 2026-03-13 17:25 by njzyff
[考研] 土木第一志愿276求调剂,科研和技能十分丰富,求新兴方向的导师收留 +3 土木小天才 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:01 by JourneyLucky
[考研] 材料301分求调剂 +5 Liyouyumairs 2026-03-12 5/250 2026-03-13 14:42 by JourneyLucky
[考研] 一志愿山大07化学 332分 四六级已过 本科山东双非 求调剂! +3 不想理你 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:18 by JourneyLucky
[考博] 26读博 +4 Rui135246 2026-03-12 10/500 2026-03-13 07:15 by gaobiao
信息提示
请填处理意见