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anglerenyan

铜虫 (小有名气)

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专业: 有机合成

[求助] 关于Ev71 蛋白纯化

EV71 蛋白本身性质比较敏感脆弱
按照正常蛋白纯化步骤纯化完蛋白之后
总是表现的无活性
换了各种可疑条件，如换buffer 换菌
破菌是用超声破碎法
每次纯化完之后核酸量很多
这会对蛋白活性有影响吗
而且蛋白性质不稳定，起初蛋白存在活性
不管放到-80 冰箱还是4度冰箱，隔天蛋白失活。。
拜托各位虫子大神希望能给点提示！！！！
一直做不出好的结果而且又找不到原因
真的很着急了！！！！

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加油吧骚年！

1楼 2015-06-28 10:46:56

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anglerenyan

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引用回帖:

2楼: Originally posted by pennchem at 2015-06-28 17:41:26
或许可以问以下几个问题
（1）蛋白活性的丧失是因为蛋白质激降解了，还是蛋白质变性了？
（2）如果蛋白质变性了，是逐步变性，还是立即变性？
（3）不同保存的方法，失活的情况有什么不同？

谢谢你的问题，恳请指点~~~~