| 查看: 3149 | 回复: 41 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
跑出来的PCR结果一直是这样的，不知各位大虾可否指点指点，多谢多谢 已有11人参与
|
||
应该跑出目的条带的，可是一直是拖尾，从加样孔就开始拖。。。。 怎么办，是什么问题呢希望各位大哥大姐路过的看过的给指点指点哦  IMG_20150610_124807.jpg  IMG_20150616_120302.jpg  IMG_20150616_120356.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有158人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有15人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 反向PCR扩不出来
已经有4人回复
- 质粒是PCR产物，片段是磷酸化的，易自连，求连接体系中二者的比例，希望高手指点
已经有10人回复
- 求助！新人，融合PCR一直融不上！！！
已经有24人回复
- 求助： 此情况下是做主成分分析 还是做相关分析呢？哪个更合适？请大虾指点 多谢
已经有6人回复
- PCR产物做克隆，菌液涂平板后长得很慢是什么原因？
已经有17人回复
- 眼含热泪求助：pcDNA3.1 插入4000bp 质粒构建，大虾请留步
已经有6人回复
- fluent封闭流场的遇到的一些问题，麻烦大家来探讨一下，求大神指点。多谢各位
已经有9人回复
- 菌液pcr总是做不出！求高手解答！
已经有18人回复
- 融合PCR最后一步做不出来，求救！！！
已经有23人回复
- KOD和Taq酶的PCR产物为什么不一样？请各位高手指点一下！
已经有6人回复
- 荧光定量PCR进行二重检测怎样处理FAM 和VIC信号相互干扰的问题？（ABI StepOne Plus）
已经有3人回复
- GIS中两个栅格图层，如何进行相关分析？ 急求各位大虾指点
已经有14人回复
- 求助-4Kb的基因P不出来
已经有37人回复
- PCR空白跑出了与目的基因一样的一条浅带
已经有16人回复
- PCR时出现了非目的片段的超大片段条带
已经有16人回复
- 关于融合PCR的问题
已经有14人回复
- overlap PCR做不出来呐。。。。
已经有23人回复
- pcr一直不出结果，可以从哪些方面调整
已经有13人回复
- 降落PCR一直 跑不出来（用于DGGE）
已经有16人回复
- 求助:TAKARA 10*PCR 缓冲液的配制!
已经有7人回复
- 做过用同源重组进行基因敲出的朋友请进，PCR做不出来！！
已经有16人回复
- PCR一直扩不出目的条带
已经有10人回复
- 【求助/交流】DNA提取方法（用于PCR-DGGE）
已经有20人回复
781055707
木虫 (著名写手)
- 应助: 291 (大学生)
- 金币: 3118.2
- 散金: 46
- 红花: 19
- 帖子: 2030
- 在线: 579.3小时
- 虫号: 3046113
- 注册: 2014-03-13
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
6楼2015-06-17 00:18:23
2楼2015-06-16 20:19:10
3楼2015-06-16 20:33:08
|
我做的是长距离PCR，要跑出的条带是12000和11000，就是应该是电泳图上最上边两条marker之间的条带。一直是拖尾。 三条引物是：（上游引物）P：5’一GCC CTG CCT GTC CAT TAC ACT GAT GAC ATT ATG CTG AC-3’ （下游引物）Q：5'-GGC CCT ACA ACC ATT CTG CCT TTC ACT TTC AGT GCA ATA-3’ （下游引物）B：5’-CCC CAA ACT ATA ACC AGC ACC TTG AAC TTC CCC TCT CATA-3’； 反应体系：引物P、Q、B(20 pmol／ul)分别2ul、1ul、1ul，模板基因组DNA 2ul(约100 ng)，TaKaRa LA Taq酶0．25ul(5 U／ul)，2×GC缓冲液I 12．5ul，dNTP 4ul，蒸馏水补足，总反应体积25ul。 反应条件：94℃预变性2 min，前10个循环98℃变性10 s，68℃退火／延伸10 min，后20个循环98℃变性10 s，68℃延伸10 min 20s，共进行30个循环。电泳：配制6g/L琼脂糖凝胶，PCR产物5ul与6×上样缓冲液1ul混匀上样，在恒压75 V电泳，成像 我就是想问问这样拖带可能跟什么关系最大  我做的时候就一直在变化引物浓度比例，和退火温度。用梯度PCR仪做过，退火温度从65、66、-69、70，也没什么明显的结果条带哦 |
4楼2015-06-16 21:55:43
6