应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 跑出来的PCR结果一直是这样的，不知各位大虾可否指点指点，多谢多谢
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
54/1返回列表
查看: 3153  |  回复: 41
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

王小燕30

铜虫 (小有名气)

[求助] 跑出来的PCR结果一直是这样的，不知各位大虾可否指点指点，多谢多谢 已有11人参与

应该跑出目的条带的，可是一直是拖尾，从加样孔就开始拖。。。。怎么办，是什么问题呢希望各位大哥大姐路过的看过的给指点指点哦

跑出来的PCR结果一直是这样的，不知各位大虾可否指点指点，多谢多谢
IMG_20150610_124807.jpg


跑出来的PCR结果一直是这样的，不知各位大虾可否指点指点，多谢多谢-1
IMG_20150616_120302.jpg


跑出来的PCR结果一直是这样的，不知各位大虾可否指点指点，多谢多谢-2
IMG_20150616_120356.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2015-06-16 14:52:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王小燕30

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
33楼: Originally posted by calorimetry at 2015-06-19 10:45:37
我的美国师姐回答的已经够全面，无论是PCR本身，还是DNA电泳，她还是说准备再查一下文献在继续讨论。她7月就回国度假了，到时你可以直接与她讨论。

恩，回头我怎么联系上她哦？而且她忙不，我这样打扰方便不？   非常感谢了😁

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
39楼2015-06-19 11:28:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 42 个回答

晞朔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
请提供反应体系和程序。让大家参考参考
赞一下 回复此楼
2楼2015-06-16 20:19:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mangool

新虫 (初入文坛)
有可能是提取核酸的纯度不好
赞一下 回复此楼
3楼2015-06-16 20:33:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王小燕30

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-06-16 20:19:10
请提供反应体系和程序。让大家参考参考

我做的是长距离PCR，要跑出的条带是12000和11000，就是应该是电泳图上最上边两条marker之间的条带。一直是拖尾。
三条引物是：（上游引物）P：5’一GCC CTG CCT GTC CAT TAC ACT GAT GAC ATT ATG CTG AC-3’
（下游引物）Q：5'-GGC CCT ACA ACC ATT CTG CCT TTC ACT TTC AGT GCA ATA-3’
（下游引物）B：5’-CCC CAA ACT ATA ACC AGC ACC TTG AAC TTC CCC TCT CATA-3’；
反应体系：引物P、Q、B(20 pmol／ul)分别2ul、1ul、1ul，模板基因组DNA 2ul(约100 ng)，TaKaRa LA Taq酶0．25ul(5 U／ul)，2×GC缓冲液I 12．5ul，dNTP 4ul，蒸馏水补足，总反应体积25ul。
反应条件：94℃预变性2 min，前10个循环98℃变性10 s，68℃退火／延伸10 min，后20个循环98℃变性10 s，68℃延伸10 min 20s，共进行30个循环。电泳：配制6g/L琼脂糖凝胶，PCR产物5ul与6×上样缓冲液1ul混匀上样，在恒压75 V电泳，成像
我就是想问问这样拖带可能跟什么关系最大



我做的时候就一直在变化引物浓度比例，和退火温度。用梯度PCR仪做过，退火温度从65、66、-69、70，也没什么明显的结果条带哦
赞一下 回复此楼
4楼2015-06-16 21:55:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 42 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 294分080500材料科学与工程求调剂 +4 柳溪边 2026-03-26 4/200 2026-03-26 21:14 by XPU李庆
[考研] 085601求调剂总分293英一数二 +4 钢铁大炮 2026-03-24 4/200 2026-03-26 16:28 by dick_runner
[考研] 292求调剂 +9 鹅鹅鹅额额额额� 2026-03-25 10/500 2026-03-26 16:27 by 不吃魚的貓
[考研] 北科281学硕材料求调剂 +17 tcxiaoxx 2026-03-20 19/950 2026-03-26 16:04 by 不吃魚的貓
[考研] 275求调剂 +9 Micky11223 2026-03-25 11/550 2026-03-26 15:54 by 不吃魚的貓
[考研] 0856求调剂 +8 zhn03 2026-03-25 9/450 2026-03-26 13:42 by zzll406
[考研] 打过很多竞赛，085406控制工程300分，求调剂 +3 askeladz 2026-03-26 3/150 2026-03-26 09:08 by 给你你注意休息
[考研] 334分 一志愿武理-080500 材料求调剂 +4 李李不服输 2026-03-25 4/200 2026-03-25 21:26 by 星空星月
[考研] 0854人工智能方向招收调剂 +4 章小鱼567 2026-03-24 4/200 2026-03-25 13:29 by 2177681040
[考研] 359求调剂 +3 王了个楠 2026-03-25 3/150 2026-03-25 12:50 by Dyhoer
[考研] 282求调剂 +3 wcq131415 2026-03-24 3/150 2026-03-25 12:16 by userper
[考研] 0854电子信息求调剂 324 +4 Promise-jyl 2026-03-23 4/200 2026-03-25 11:36 by Sugarlight
[考研] 086003食品工程求调剂 +6 淼淼111 2026-03-24 6/300 2026-03-25 10:29 by 3Strings
[考研] 化学调剂 +6 yzysaa 2026-03-21 6/300 2026-03-25 09:27 by aa331100
[考研] 311求调剂 +3 冬十三 2026-03-24 3/150 2026-03-24 21:31 by peike
[考研] 085404电子信息284分求调剂 +4 13659058978 2026-03-24 4/200 2026-03-24 12:15 by syl20081243
[考研] 384求调剂 +3 子系博 2026-03-22 6/300 2026-03-23 21:45 by 子系博
[考研] 328求调剂 +4 LHHL66 2026-03-23 4/200 2026-03-23 14:55 by lbsjt
[考研] 291求调剂 +5 孅華 2026-03-22 5/250 2026-03-23 09:20 by haoshis
[考研] 285求调剂 +6 ytter 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:09 by 星空星月
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭