应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 跑出来的PCR结果一直是这样的，不知各位大虾可否指点指点，多谢多谢
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
53/1返回列表
查看: 3188  |  回复: 41
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

王小燕30

铜虫 (小有名气)

[求助] 跑出来的PCR结果一直是这样的，不知各位大虾可否指点指点，多谢多谢 已有11人参与

应该跑出目的条带的，可是一直是拖尾，从加样孔就开始拖。。。。怎么办，是什么问题呢希望各位大哥大姐路过的看过的给指点指点哦

跑出来的PCR结果一直是这样的，不知各位大虾可否指点指点，多谢多谢
IMG_20150610_124807.jpg


跑出来的PCR结果一直是这样的，不知各位大虾可否指点指点，多谢多谢-1
IMG_20150616_120302.jpg


跑出来的PCR结果一直是这样的，不知各位大虾可否指点指点，多谢多谢-2
IMG_20150616_120356.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2015-06-16 14:52:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

calorimetry

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼主的PCR明显的出现了涂带，我大概知道原因。

我把你的问题发给我美国的师姐（她就是 本版的 顾问 凌波丽），我明天上午大概能够得到她的回复（美国跟这里有数小时的时差），看她是否同意我的见解，明天或者回复你吧。
赞一下(1人) 回复此楼
30楼2015-06-18 16:58:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 42 个回答

晞朔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
请提供反应体系和程序。让大家参考参考
赞一下 回复此楼
2楼2015-06-16 20:19:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mangool

新虫 (初入文坛)
有可能是提取核酸的纯度不好
赞一下 回复此楼
3楼2015-06-16 20:33:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王小燕30

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-06-16 20:19:10
请提供反应体系和程序。让大家参考参考

我做的是长距离PCR，要跑出的条带是12000和11000，就是应该是电泳图上最上边两条marker之间的条带。一直是拖尾。
三条引物是：（上游引物）P：5’一GCC CTG CCT GTC CAT TAC ACT GAT GAC ATT ATG CTG AC-3’
（下游引物）Q：5'-GGC CCT ACA ACC ATT CTG CCT TTC ACT TTC AGT GCA ATA-3’
（下游引物）B：5’-CCC CAA ACT ATA ACC AGC ACC TTG AAC TTC CCC TCT CATA-3’；
反应体系：引物P、Q、B(20 pmol／ul)分别2ul、1ul、1ul，模板基因组DNA 2ul(约100 ng)，TaKaRa LA Taq酶0．25ul(5 U／ul)，2×GC缓冲液I 12．5ul，dNTP 4ul，蒸馏水补足，总反应体积25ul。
反应条件：94℃预变性2 min，前10个循环98℃变性10 s，68℃退火／延伸10 min，后20个循环98℃变性10 s，68℃延伸10 min 20s，共进行30个循环。电泳：配制6g/L琼脂糖凝胶，PCR产物5ul与6×上样缓冲液1ul混匀上样，在恒压75 V电泳，成像
我就是想问问这样拖带可能跟什么关系最大



我做的时候就一直在变化引物浓度比例，和退火温度。用梯度PCR仪做过，退火温度从65、66、-69、70，也没什么明显的结果条带哦
赞一下 回复此楼
4楼2015-06-16 21:55:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 42 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿武汉理工，总分321，英一数二，求老师收留。 +11 nnnnnnn5 2026-03-25 11/550 2026-03-29 20:42 by 无际的草原
[考研] 求调剂 +9 张zz111 2026-03-27 10/500 2026-03-29 14:57 by 唐沐儿
[考研] 2026年华南师范大学欢迎化学，化工，生物，生医工等专业优秀学子加入！ +3 llss0711 2026-03-28 6/300 2026-03-29 10:26 by llss0711
[考研] 356求调剂 +3 gysy?s?a 2026-03-28 3/150 2026-03-29 00:33 by 544594351
[考研] 295求调剂 +4 wei-5 2026-03-26 4/200 2026-03-28 23:20 by 小木虫tim
[考研] 322求调剂 +7 宋明欣 2026-03-27 7/350 2026-03-28 21:27 by sanrepian
[考研] 食品工程专硕一志愿中海洋309求调剂 +4 小张zxy张 2026-03-26 8/400 2026-03-28 19:25 by lbsjt
[考研] 0703本科郑州大学求调剂 +3 nhj_ 2026-03-25 3/150 2026-03-28 13:24 by Iveryant
[考研] 286求调剂 +12 PolarBear11 2026-03-26 12/600 2026-03-28 12:14 by zllcz
[考研] 286求调剂 +4 丢掉懒惰 2026-03-27 7/350 2026-03-28 08:07 by baoball
[有机交流] 高温高压反应求助 10+4 chibby 2026-03-25 4/200 2026-03-27 21:08 by BT20230424
[考研] 266求调剂 +11 阳阳哇塞 2026-03-27 12/600 2026-03-27 17:56 by yu221
[考研] 考研调剂 +4 Sanmu-124 2026-03-26 4/200 2026-03-27 17:49 by kiokin
[考研] 266分求材料化工冶金矿业等专业的调剂 +4 哇呼哼呼哼 2026-03-26 4/200 2026-03-27 17:02 by zhyzzh
[考研] 274求调剂 +17 顾九笙要谦虚 2026-03-24 23/1150 2026-03-27 15:16 by caszguilin
[考研] 343求调剂 +4 赠我一本书 2026-03-23 4/200 2026-03-27 00:40 by wxiongid
[考研] 求调剂 一志愿 本科 北科大 化学 343 +6 13831862839 2026-03-24 7/350 2026-03-26 22:57 by 不吃魚的貓
[考研] 生物学 296 求调剂 +4 朵朵- 2026-03-26 6/300 2026-03-26 19:01 by 不吃魚的貓
[考研] 344求调剂 +3 desto 2026-03-24 3/150 2026-03-24 10:09 by 搏击518
[考研] 335求调剂 +4 yuyu宇 2026-03-23 5/250 2026-03-23 23:49 by Txy@872106
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭