应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 跑出来的PCR结果一直是这样的，不知各位大虾可否指点指点，多谢多谢
52/1返回列表
查看: 3150  |  回复: 41
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

王小燕30

铜虫 (小有名气)

[求助] 跑出来的PCR结果一直是这样的，不知各位大虾可否指点指点，多谢多谢 已有11人参与

应该跑出目的条带的，可是一直是拖尾，从加样孔就开始拖。。。。怎么办，是什么问题呢希望各位大哥大姐路过的看过的给指点指点哦

跑出来的PCR结果一直是这样的，不知各位大虾可否指点指点，多谢多谢
IMG_20150610_124807.jpg


跑出来的PCR结果一直是这样的，不知各位大虾可否指点指点，多谢多谢-1
IMG_20150616_120302.jpg


跑出来的PCR结果一直是这样的，不知各位大虾可否指点指点，多谢多谢-2
IMG_20150616_120356.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2015-06-16 14:52:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王小燕30

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
15楼: Originally posted by wangs2004 at 2015-06-17 19:43:26
乍一看我以为日光灯呢,LZ的模板是不是坏掉了

估计是模版不好了
赞一下 回复此楼
17楼2015-06-17 22:13:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 42 个回答

晞朔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
请提供反应体系和程序。让大家参考参考
赞一下 回复此楼
2楼2015-06-16 20:19:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mangool

新虫 (初入文坛)
有可能是提取核酸的纯度不好
赞一下 回复此楼
3楼2015-06-16 20:33:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王小燕30

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-06-16 20:19:10
请提供反应体系和程序。让大家参考参考

我做的是长距离PCR，要跑出的条带是12000和11000，就是应该是电泳图上最上边两条marker之间的条带。一直是拖尾。
三条引物是：（上游引物）P：5’一GCC CTG CCT GTC CAT TAC ACT GAT GAC ATT ATG CTG AC-3’
（下游引物）Q：5'-GGC CCT ACA ACC ATT CTG CCT TTC ACT TTC AGT GCA ATA-3’
（下游引物）B：5’-CCC CAA ACT ATA ACC AGC ACC TTG AAC TTC CCC TCT CATA-3’；
反应体系：引物P、Q、B(20 pmol／ul)分别2ul、1ul、1ul，模板基因组DNA 2ul(约100 ng)，TaKaRa LA Taq酶0．25ul(5 U／ul)，2×GC缓冲液I 12．5ul，dNTP 4ul，蒸馏水补足，总反应体积25ul。
反应条件：94℃预变性2 min，前10个循环98℃变性10 s，68℃退火／延伸10 min，后20个循环98℃变性10 s，68℃延伸10 min 20s，共进行30个循环。电泳：配制6g/L琼脂糖凝胶，PCR产物5ul与6×上样缓冲液1ul混匀上样，在恒压75 V电泳，成像
我就是想问问这样拖带可能跟什么关系最大



我做的时候就一直在变化引物浓度比例，和退火温度。用梯度PCR仪做过，退火温度从65、66、-69、70，也没什么明显的结果条带哦
赞一下 回复此楼
4楼2015-06-16 21:55:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 42 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 生物学学硕，一志愿湖南大学，初试成绩338 +3 YYYYYNNNNN 2026-03-26 3/150 2026-03-26 18:40 by kdancasal
[考研] 321求调剂 +5 wasdssaa 2026-03-26 5/250 2026-03-26 18:00 by fmesaito
[考研] 材料与化工考研调剂 +10 孅華 2026-03-22 10/500 2026-03-26 15:40 by zzll406
[考研] 一志愿陕师大生物学071000，298分，求调剂 +4 SYA！ 2026-03-23 4/200 2026-03-26 15:27 by caiaijun80
[考研] 一志愿天津大学339材料与化工求调剂 +3 江往卖鱼 2026-03-26 3/150 2026-03-26 09:42 by 王小欠i
[考研] 打过很多竞赛，085406控制工程300分，求调剂 +3 askeladz 2026-03-26 3/150 2026-03-26 09:08 by 给你你注意休息
[考研] 调剂310 +3 温柔的晚安 2026-03-25 4/200 2026-03-25 23:16 by peike
[考研] 316求调剂 +9 梁茜雯 2026-03-19 9/450 2026-03-25 23:01 by peike
[考研] 333求调剂 +6 87639 2026-03-21 11/550 2026-03-25 16:17 by 87639
[考研] 359求调剂 +3 王了个楠 2026-03-25 3/150 2026-03-25 12:50 by Dyhoer
[考研] 0854电子信息求调剂 324 +4 Promise-jyl 2026-03-23 4/200 2026-03-25 11:36 by Sugarlight
[考研] 一志愿吉林大学材料与化工303分求调剂 +4 为学666 2026-03-24 4/200 2026-03-25 11:27 by BruceLiu320
[考研] 318求调剂 +3 plum李子 2026-03-23 3/150 2026-03-25 09:42 by 雾散后相遇lc
[考研] 化学调剂 +6 yzysaa 2026-03-21 6/300 2026-03-25 09:27 by aa331100
[考研] 材料学求调剂 +6 Stella_Yao 2026-03-20 6/300 2026-03-25 00:37 by baoball
[考研] 材料专硕331求调剂 +4 鲜当牛 2026-03-24 4/200 2026-03-24 15:58 by JourneyLucky
[考研] 一志愿北京化工大学 070300 学硕 336分 求调剂 +7 vv迷 2026-03-22 7/350 2026-03-23 23:44 by Txy@872106
[考研] 260求调剂 +3 朱芷琳 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:12 by 朱芷琳
[考研] 0703化学调剂 +4 妮妮ninicgb 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:39 by 学员8dgXkO
[考研] 0703化学297求调剂 +3 Daisy☆ 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:45 by ColorlessPI
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭