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yzc937168

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9楼: Originally posted by 15195997166 at 2015-06-14 10:49:43
载体上是有两个抗性的氨苄和氯霉素然而电转后验证过的转化子在氯霉素抗性里面长可是在氨苄培养基里面反而不长氨苄是野生菌也自身带有的抗性觉得很奇怪理论上不应该在这种双抗培养基中都长吗...

感觉像是载体未稳定表达

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吼吼吼～

11楼2015-06-14 12:35:17

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liuderong

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一般来说，如果宿主本身就有某种抗性，再转一个这种抗性的质粒的话，转进去的质粒培养一段时间后可能会丢失。平时我们往大肠杆菌里转质粒后，在无抗性的培养基培养一段时间后，或者放置时间长了偶尔也会碰到质粒丢失的。像你的情况应该用宿主本身没有的那个抗性筛选。

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12楼2015-06-14 15:08:26

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15195997166

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12楼: Originally posted by liuderong at 2015-06-14 15:08:26
一般来说，如果宿主本身就有某种抗性，再转一个这种抗性的质粒的话，转进去的质粒培养一段时间后可能会丢失。平时我们往大肠杆菌里转质粒后，在无抗性的培养基培养一段时间后，或者放置时间长了偶尔也会碰到质粒丢失 ...

可是我重组菌在含氯霉素的培养基里面长得好好的重新描述一下我的问题哈：我用的载体上是有两个抗性的氨苄和氯霉素然而电转后验证过的转化子在氯霉素抗性里面长可是在氨苄培养基里面反而不长氨苄是野生菌也自身带有的抗性觉得很奇怪理论上不应该在这种双抗培养基中都长吗

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简单而快乐

13楼2015-06-14 17:13:38

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