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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 今天遇到一个奇葩的问题，想了一天也没想通，求解释
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yzc937168

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
9楼: Originally posted by 15195997166 at 2015-06-14 10:49:43
载体上是有两个抗性的 氨苄和氯霉素 然而 电转后验证过的转化子在氯霉素抗性里面长 可是在氨苄培养基里面反而不长  氨苄是野生菌也自身带有的抗性  觉得很奇怪 理论上不应该在这种双抗培养基中都长吗...

感觉像是载体未稳定表达
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吼吼吼～
11楼2015-06-14 12:35:17
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liuderong

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
一般来说，如果宿主本身就有某种抗性，再转一个这种抗性的质粒的话，转进去的质粒培养一段时间后可能会丢失。平时我们往大肠杆菌里转质粒后，在无抗性的培养基培养一段时间后，或者放置时间长了偶尔也会碰到质粒丢失的。像你的情况应该用宿主本身没有的那个抗性筛选。
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12楼2015-06-14 15:08:26
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15195997166

金虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by liuderong at 2015-06-14 15:08:26
一般来说，如果宿主本身就有某种抗性，再转一个这种抗性的质粒的话，转进去的质粒培养一段时间后可能会丢失。平时我们往大肠杆菌里转质粒后，在无抗性的培养基培养一段时间后，或者放置时间长了偶尔也会碰到质粒丢失 ...

可是我重组菌在含氯霉素的培养基里面长得好好的 重新描述一下我的问题哈：我用的载体上是有两个抗性的 氨苄和氯霉素 然而 电转后验证过的转化子在氯霉素抗性里面长 可是在氨苄培养基里面反而不长  氨苄是野生菌也自身带有的抗性  觉得很奇怪 理论上不应该在这种双抗培养基中都长吗
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简单而快乐
13楼2015-06-14 17:13:38
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15195997166

金虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by yzc937168 at 2015-06-14 12:35:17
感觉像是载体未稳定表达...

不解呢
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简单而快乐
14楼2015-06-14 17:15:11
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yuzhichao
祝福
15楼2015-06-14 17:21:59
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wasxnbe
16楼2015-06-14 18:09:46
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gengxin60
祝福
17楼2015-06-14 18:33:15
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ThinkerDay

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我想这可能是RNAi的作用，很明显

[ 发自小木虫客户端 ]
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18楼2015-06-14 19:53:18
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yzc937168

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
14楼: Originally posted by 15195997166 at 2015-06-14 17:15:11
不解呢...

应该是表达抑制类作用，你转入的载体引起了自身免疫，导致基因组中的抗性也不表达了
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吼吼吼～
19楼2015-06-15 09:22:24
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拂晓晨风

木虫 (正式写手)
你抽个质粒看看
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20楼2015-06-17 09:32:55
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