| 查看: 3548 | 回复: 21 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
zhangyep121铜虫 (小有名气)
|
[交流]
关于热启动taq酶和逆转录酶相互抑制的问题
|
||
| 亲们，发挥大家想象力和智商的时候到了，我现在遇到一个PCR难题，跟大家讨论一下，希望大家集思广益，支支招，在做RNA类扩增的时候，发现逆转录酶对热启动taq酶存在抑制作用，这一点已经确认了，目前发现，只有在taq酶和逆转录酶都有活性的情况下，才会抑制，taq酶只有在跟Mg2+接触时，才有活性，也就是说，不遇到镁离子，taq酶是不会受逆转录酶影响的，而50度逆转录期间，taq酶一旦具有活性，就会被体系中的逆转录酶搞，影响扩增效果，但是50度时如果没接触到逆转酶，即使在95度时加入逆转录酶，是不会影响扩增效果的，也就是说逆转录酶失活后，不抑制taq酶，现在请问大家：如何使50度15分钟逆转录阶段，Mg离子，taq酶，逆转录酶，在一个体系中，却又不相互影响？ |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有263人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- Taq 酶扩增的片段能连接平末端载体吗
已经有3人回复
- 高保真PCR酶的选择问题
已经有15人回复
- 求赐教，扩增3000bp片段是用高保真Taq酶好，还是用高保真再加A尾好一点？
已经有27人回复
- Taq和KOD酶使用讨论
已经有7人回复
- Taq聚合酶的活性
已经有5人回复
- 有没有人用过全式金公司的热启动Taq酶，那个算高保真酶么
已经有7人回复
- KOD和Taq酶的PCR产物为什么不一样？请各位高手指点一下！
已经有6人回复
- 求助！群落PCR，忘记加taq酶，可以在原来的体系中补上taq酶重新PCR么？
已经有6人回复
- PCR产物末端加A，Taq酶的选择
已经有3人回复
- LA taq ,ex taq, rtaq, dream taq 有什么不同？PCR情况很诡异
已经有3人回复
- 相同条件下，taq酶可以PCR出条带，而Primer star却不能
已经有10人回复
- 关于taq酶后加A的交流
已经有7人回复
- 大家做PCR 的时候都用的什么taq酶
已经有21人回复
- 做PCR加taq酶时忘记换枪头了，酶还能用吗？
已经有19人回复
- Taq酶PCR的问题
已经有6人回复
- 关于TAKARA的Ex Taq 酶~
已经有6人回复
- 图例请教聚合酶（Taq酶)外切和内切具体怎么起作用的，急！
已经有11人回复
- Ex taq酶的保真性？？
已经有4人回复
- puf酶与普通Taq酶混用PCR问题
已经有22人回复
- 【求助】takara的LA—Taq酶能不能直接用于T载体的连接...？
已经有6人回复
- 【求助】高保真的taq酶 怎么才能产生polyA尾巴
已经有16人回复
- 【求助/交流】普通Taq酶突变率的问题
已经有5人回复
- 【分享】大家用TAKARA试剂（普通的TAQ酶），出问题的可多？
已经有18人回复
- 【求助/交流】将PCR反应体系中的buffer,mg2+,dNTP,Taq酶以及引物和水混合后-20℃长期�
已经有10人回复
- 【分享】提高PCR特异性的方法
已经有10人回复
- 【专题】PCR实验技术指南
已经有535人回复
18761615793
木虫 (正式写手)
小虫
- MolEPI: 1
- 应助: 172 (高中生)
- 金币: 646.4
- 散金: 170
- 红花: 16
- 帖子: 863
- 在线: 144.9小时
- 虫号: 3603131
- 注册: 2014-12-19
- 专业: 抗体工程学
4楼2015-06-04 14:43:52
18761615793
木虫 (正式写手)
小虫
- MolEPI: 1
- 应助: 172 (高中生)
- 金币: 646.4
- 散金: 170
- 红花: 16
- 帖子: 863
- 在线: 144.9小时
- 虫号: 3603131
- 注册: 2014-12-19
- 专业: 抗体工程学
2楼2015-06-04 09:20:32
cry_2013
木虫 (正式写手)
- 应助: 47 (小学生)
- 金币: 1960.8
- 散金: 342
- 红花: 6
- 帖子: 366
- 在线: 246.6小时
- 虫号: 3426497
- 注册: 2014-09-18
- 性别: MM
- 专业: 兽医传染病学
3楼2015-06-04 09:32:53
zhangyep121
铜虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 411.6
- 散金: 80
- 红花: 5
- 帖子: 205
- 在线: 65.3小时
- 虫号: 1135820
- 注册: 2010-10-31
- 专业: 食品科学基础
5楼2015-06-05 13:50:31
