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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR产物跑胶
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你测序过了吗？可能就是你的目的片段呢，因为上样量啊 胶浓度啊等等原因， 造成跑胶结果偏大 这种情况在实验中也很常见啊，没有测序先不能盲目的判断啊
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todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
11楼2015-06-04 16:29:58
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calorimetry

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 18761615793 at 2015-06-04 16:26:46
你见过二聚体有5K这么大的情况么。。。...

如果污染的ssDNA发生了局部链接那！这样会形成更大的部分双链的DNA分子，并且在PCR时把缺口补全，这样的可能不会不存在吧？可能我的术语用的不恰当。抱歉！
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12楼2015-06-04 17:06:46
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calorimetry

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 18761615793 at 2015-06-04 16:26:46
你见过二聚体有5K这么大的情况么。。。...

你可以说出你的理由呀...

没有取笑之意，因为我也好久没有做过PCR了。
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13楼2015-06-04 17:07:55
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calorimetry

铜虫 (正式写手)
引物二聚体当然不会有5K这么大。

我上面说的二聚体是污染的DNA变性后，不同的污染的DNA彼此可能形成的新的部分互补的DNA部分双链，在PCR被补全为新的DNA，并且充当了新的底物，这样就可能扩增出片段大得多的新的DNA。

我使用的二聚体这词用的不对，抱歉！
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14楼2015-06-04 17:15:23
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alamzhucc

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
问题不大，我们也遇到过，重新走一次胶或许就对了
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15楼2015-06-05 09:54:01
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫
引用回帖:
12楼: Originally posted by calorimetry at 2015-06-04 17:06:46
如果污染的ssDNA发生了局部链接那！这样会形成更大的部分双链的DNA分子，并且在PCR时把缺口补全，这样的可能不会不存在吧？可能我的术语用的不恰当。抱歉！...

没事没事 淡定淡定
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todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
16楼2015-06-05 10:36:38
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫
引用回帖:
14楼: Originally posted by calorimetry at 2015-06-04 17:15:23
引物二聚体当然不会有5K这么大。

我上面说的二聚体是污染的DNA变性后，不同的污染的DNA彼此可能形成的新的部分互补的DNA部分双链，在PCR被补全为新的DNA，并且充当了新的底物，这样就可能扩增出片段大得多的新的 ...

这么当真干嘛丫
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todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
17楼2015-06-05 10:37:11
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calorimetry

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
17楼: Originally posted by 18761615793 at 2015-06-05 10:37:11
这么当真干嘛丫...

18楼2015-06-05 11:15:39
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calorimetry

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
17楼: Originally posted by 18761615793 at 2015-06-05 10:37:11
这么当真干嘛丫...

你别生气嘛。我可没有生气。

你的话真的提醒我思考了一些问题，而且我昨晚查了文献，我说的情况还真的存在。
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19楼2015-06-05 11:16:58
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yinier

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
上样量的问题吧，上样量多，然后marker有的时候也不是很准。
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细胞分子生物学，植物学
20楼2015-06-05 15:56:57
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