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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » ATP荧光实验求助！！！
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soyida

金虫 (初入文坛)

[求助] ATP荧光实验求助！！！ 已有2人参与

在下想用荧光显微镜和EMCCD结合Luciferin–luciferase的方法，观察细胞分泌ATP的荧光。
在一些文献中查到了同样的做法，但难点是查不到他们用的荧光素酶是哪里购买的。。。。
希望有知情的高手能够热心帮助，提供详细的购买方式，非常感谢！

另外补充一下，不是用化学发光仪或荧光光谱仪测量、或裂解细胞后测细胞内容物的，而是对活体细胞进行胞外检测。
若能提供购买方式，最好可以附上应用该试剂的文献。

再三顿首，不知所言。。
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1楼 2015-06-03 09:50:07
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soyida

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
12楼: Originally posted by calorimetry at 2015-06-05 10:22:56
如果楼主只是想想检测目的细胞在特定条件下是否能够分泌出ATP，那么实验设计就很简单，只要检测细胞外的ATP的变化或者有无即可，检测ATP的存在可以直接用红外傅里叶变换光谱，通过检测ATP的特征吸收峰并与标准的ATP ...

好吧，你说的我知道是对的，但是和我的需求不相符。
我希望能通过探针达到ATP分泌的实时可视呈现，就像应用已经很普及的钙探针实验一样。
所以一楼我就提出：希望能够提供购买胞外ATP荧光探针的方式。
如果要求是这样的话，你可以帮助我吗？
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14楼2015-06-05 19:12:26
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calorimetry

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用荧光显微镜和EMCCD结合Luciferin–luciferase的方法，观察细胞分泌ATP的荧光?
你要具体观察的对象是什么？荧光显微镜可以用于活细胞观测，我也有很多文献，但是你要告诉我你具体的实验目的。
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2楼2015-06-03 10:08:48
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soyida

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by calorimetry at 2015-06-03 10:08:48
用荧光显微镜和EMCCD结合Luciferin–luciferase的方法，观察细胞分泌ATP的荧光?
你要具体观察的对象是什么？荧光显微镜可以用于活细胞观测，我也有很多文献，但是你要告诉我你具体的实验目的。

加入荧光探针之后刺激细胞，可能用药理学或机械力刺激手段，这时细胞会分泌ATP
我就是想观察这个现象
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3楼2015-06-03 14:28:47
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calorimetry

铜虫 (正式写手)
不知道你的荧光分子标记的蛋白质或者其他分子有什么具体要求，一般而言，可以直接用有机荧光分子就行，另一个问题考虑细胞定位，当然是对活细胞进行荧光检测实验效果更好。
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4楼2015-06-03 16:02:19
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