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laraine40

金虫 (小有名气)

[求助] 想用重组的方法将目的基因连到载体上,求助引物设计 已有1人参与

最近一直在做克隆,酶切连接的方法一直失败,想换成重组的方法重新试试,3端引物设计有些疑问,是将载体的28个碱基加在前头,目的片段的28个加在后头,然后分别反向互补吗?绕晕了,求大神指导
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laraine40

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by my_father at 2015-06-02 20:04:47
你用的哪家的重组试剂盒?
我当时用的是Vazyme的ClonExpressII,重组用的载体部分只需要15个碱基或者保留酶切位点再加6个碱基,一共也就加21个碱基。
这家公司有个设计同源重组引物的软件,我附件发给你,很好用的 ...

谢谢!最近没上小木虫,我用另外的方法做出来了!
3楼2015-09-10 18:55:26
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my_father

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laraine40: 金币+20, ★★★★★最佳答案 2015-09-10 18:54:56
你用的哪家的重组试剂盒?
我当时用的是Vazyme的ClonExpressII,重组用的载体部分只需要15个碱基或者保留酶切位点再加6个碱基,一共也就加21个碱基。
这家公司有个设计同源重组引物的软件,我附件发给你,很好用的。

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  • 附件 1 : CE_Design_V1.03.rar
  • 2015-06-02 20:03:18, 1.31 M
2楼2015-06-02 20:04:47
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