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tongqingjia铜虫 (小有名气)
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5×loading buffer 会与含有EDTA的蛋白质液反应么? 已有1人参与
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| 各位虫友,想请教一下,在处理蛋白样品(酸性环境,里面含有EDTA)时,加入loading buffer,溶液变成黄色,这是因为什么? |
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【答案】应助回帖
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tongqingjia: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-06-01 13:13:05
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颜色变黄更EDTA没关系 是你的样品太酸了。。。 通常在蛋白表达纯化实验中,溴酚蓝在pH低于3时会变黄,检查一下你样品的buffer,如果就只能这样,一定要用pH 6.8的Tris把pH调回来,溴酚蓝在大于4.6的时候就是蓝色的了,所以你可能需要多加一点Tirs。 不然的话,不连续SDS-PAGE浓缩分离完全依赖于pH,可能有影响。 |

2楼2015-06-01 10:42:38
tongqingjia
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