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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR扩增，求助生物大神！
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zhouting816

金虫 (小有名气)

xmcll
引用回帖:
9楼: Originally posted by cry_2013 at 2015-05-21 16:56:12
上游引物3'端最好是一样的，5‘端不一样影响不会太大

好的 谢谢

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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11楼2015-05-21 17:16:50
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Libra-z

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zhouting816: 金币+5 2015-05-22 17:07:03
貌似不能吧，AS-PCR就是利用3'端错配来检测突变位点的。如果能合成，可能是非特异性引物吧。。个人觉得是这样的

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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12楼2015-05-21 19:48:48
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mataomatao

禁虫 (正式写手)
★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-05-21 22:58:32
zhouting816: 金币+2 2015-05-22 17:07:19
本帖内容被屏蔽
13楼2015-05-21 20:38:32
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ocean_of_yu

木虫 (正式写手)

Cool
可以

[ 发自小木虫客户端 ]
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14楼2015-05-21 21:25:46
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feng890327

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zhouting816: 金币+2 2015-05-22 17:07:35
这样扩增出来很有可能会引入突变，建议重新设计引物，完全互补配对
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15楼2015-05-22 09:08:49
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zhouting816

金虫 (小有名气)

xmcll
引用回帖:
12楼: Originally posted by Libra-z at 2015-05-21 19:48:48
貌似不能吧，AS-PCR就是利用3'端错配来检测突变位点的。如果能合成，可能是非特异性引物吧。。个人觉得是这样的

看了一下AS-PCR，非常感谢！
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16楼2015-05-22 16:50:46
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zhouting816

金虫 (小有名气)

xmcll
引用回帖:
13楼: Originally posted by mataomatao at 2015-05-21 20:38:32
把点突变最好放在5“端；还有前面有几个碱基也可以；也可以在中间；放在3端  其实可能也没问题，只是觉得没有另外两种靠谱

谢谢~~
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17楼2015-05-22 16:51:11
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zhouting816

金虫 (小有名气)

xmcll
引用回帖:
15楼: Originally posted by feng890327 at 2015-05-22 09:08:49
这样扩增出来很有可能会引入突变，建议重新设计引物，完全互补配对

谢谢~~
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18楼2015-05-22 16:51:28
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王冠傑

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zhouting816: 金币+1, ★有帮助 2015-05-25 15:57:44
3端的碱基匹配度会影响扩增效率。还有3端最好的G或者C，这样结合度才会更强。
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19楼2015-05-22 19:14:04
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yuying0421

新虫 (职业作家)
可以的，如果是百分之百匹配，那怎么会有副产物呢？
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20楼2015-05-25 09:46:59
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