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蛋白质的免疫沉淀和Western Bloting检测磷酸化的问题
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| 本人研一，刚开始入门生物科研，目前要研究一个蛋白质A是否发生了磷酸化，初步定的实验方案为：提取细胞总蛋白，用A蛋白的特异性抗体通过免疫沉淀技术纯化A蛋白，用A蛋白做WB，用磷酸化抗体检测磷酸化水平。那么问题来了，对于检测磷酸化的抗体我是该如何买呢？教科室上说磷酸化主要有三种，酪氨酸磷酸化、丝氨酸磷酸化和苏氨酸磷酸化，这三种抗体我都要买吗？到时候混在一起使用？还是说市场上卖的一只磷酸化抗体只要是发生了磷酸化都能检测出来？希望哪位大侠能帮忙解答一下，做过磷酸化研究的最好，越详细越好。 |
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