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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 二硫键 蛋白质结构
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瑞妞

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by liuderong at 2015-05-15 10:42:21
不太清楚你说的定量是指什么意思，是定量二硫键数量，还是定量偶联蛋白的数量，还是蛋白-蛋白或氨基酸-氨基酸偶联强度的定量

换句话说，我不在上样缓冲液中加入巯基乙醇或者DTT，与加入强还原剂的结果比较是不是就能表明蛋白中存在二硫键作用？
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11楼2015-05-15 15:20:54
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随风飘摇11

木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
瑞妞: 金币+8 2015-05-15 15:43:57
引用回帖:
10楼: Originally posted by 瑞妞 at 2015-05-15 15:18:51
只用普通的SDS-PAGE电泳吗？...

不能

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天道酬勤
12楼2015-05-15 15:35:01
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瑞妞

银虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 随风飘摇11 at 2015-05-15 15:35:01
不能
...

是不是需要使用荧光标记？在文献上看到这种方法。另外这种方法条件与普通电泳有何区别？因为刚刚接触这一方面，所以很多方面不是很明白，谢啦。
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13楼2015-05-15 15:45:30
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随风飘摇11

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
瑞妞: 金币+2 2015-05-15 16:04:19
引用回帖:
13楼: Originally posted by 瑞妞 at 2015-05-15 15:45:30
是不是需要使用荧光标记？在文献上看到这种方法。另外这种方法条件与普通电泳有何区别？因为刚刚接触这一方面，所以很多方面不是很明白，谢啦。...

我也不做这方面，但有看到用NBST测二硫键数目的。我嚼的是不是打质谱也可以？

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天道酬勤
14楼2015-05-15 15:56:53
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瑞妞

银虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by 随风飘摇11 at 2015-05-15 15:56:53
我也不做这方面，但有看到用NBST测二硫键数目的。我嚼的是不是打质谱也可以？
...

哦，做质谱是可以的，不过还是谢啦。
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15楼2015-05-15 16:02:33
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liuderong

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
11楼: Originally posted by 瑞妞 at 2015-05-15 15:20:54
换句话说，我不在上样缓冲液中加入巯基乙醇或者DTT，与加入强还原剂的结果比较是不是就能表明蛋白中存在二硫键作用？...

照我的理解是不能这样确定的，这样做只能推测是否存在二硫键。试一下测拉曼光谱吧，附上一篇文献 http://www.cqvip.com/QK/92456X/2007019/25687684.html
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16楼2015-05-15 17:24:34
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瑞妞

银虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by liuderong at 2015-05-15 17:24:34
照我的理解是不能这样确定的，这样做只能推测是否存在二硫键。试一下测拉曼光谱吧，附上一篇文献 http://www.cqvip.com/QK/92456X/2007019/25687684.html...

好的。谢啦。
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17楼2015-05-15 17:39:31
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wasxnbe
18楼2015-05-15 18:06:49
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