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PCR产物加尾之后连接载体的问题 已有5人参与
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使用TOYOBO公司的KOD FX酶扩增大约2.5kb的目的片段,由于要连到PMD-19T载体上,需要对PCR产物加尾。以下是我的实验步骤,请教一下有没有问题: ①PCR产物跑胶后切胶回收;②将回收的产物使用rTAQ酶体系72℃水浴保温30min加尾,③加尾后的产物4ul,soultion I 5ul,PMD-19T simple 1ul,混合后16℃水浴过夜。 连接之后的产物跑胶后发现片段大小只是原来扩增的片段,请问是哪里出问题了? |
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draco1987
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11楼2015-05-13 11:36:57
随风飘摇11
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2楼2015-05-11 22:46:06
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3楼2015-05-12 09:08:01
luwei13566
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4楼2015-05-12 16:56:42










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