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黄xia金虫 (小有名气)
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蛋白纯化问题,希望大家给我支支招,成分感谢 已有8人参与
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| 我的蛋白70多KD,上清表达,表达量还可以,在C端加了6His标签,用生工的Ni柱填料挂柱纯化,洗脱后,洗脱液中无目的蛋白,只有杂蛋白,目的蛋白在流穿液当中,说明没挂上,(平衡缓冲液pH8.0,蛋白的等电点4.6左右,上样流速尝试过0.4和0.5ml/min),由于没挂上,打算用切非变性胶的方式纯化,来做后续实验,但将切下的胶电透浓缩后,跑SDS-PAGE分析,有很多杂带,目的条带的量也少,与杂带量差不多,在切的过程中,有时候还切不到自己的目的蛋白,怎么办呀,我已经就纯化蛋白这个问题做了很久了,还没啥进展,希望各位有经验的亲给我一些建议,谢谢谢谢........无数个谢谢。 |
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黄xia
金虫 (小有名气)
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21楼2015-05-12 17:16:45
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黄xia: 金币+5, 谢谢 2015-05-10 11:03:13
silicare: 屏蔽内容, 违规存档 2016-01-12 15:37:16
黄xia: 金币+5, 谢谢 2015-05-10 11:03:13
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2楼2015-05-09 22:49:39
781055707
木虫 (著名写手)
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liuderong
铁杆木虫 (正式写手)
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4楼2015-05-10 12:00:10







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