24小时热门版块排行榜    

查看: 8777  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

寒心季

新虫 (初入文坛)

[求助] 菌落PCR跑出2条带怎么回事? 已有5人参与

PCR产物回收后连接至T载体,转化DH5α,菌落PCR后出现两条带,目的片段是500多bp,底下又出了一条,没测序选了1个克隆摇菌提取质粒继续酶切,酶切胶图正常,回收后再连接至TRV2载体,转化DH5α,菌落PCR后又出现2条带,这是怎么回事,退火是58度,12.5的体系。第一个引物是M13+/-N,第二个引物是TRV2 F/R。

菌落PCR跑出2条带怎么回事?
连接至T载体


菌落PCR跑出2条带怎么回事?-1
连接至TRV2载体
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

听风#我

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

一般来说,退火温度高跑不出带,退火温度低跑出多条带,你可以调高一点温度
8楼2015-05-14 20:36:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

随风飘摇11

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
下面的是引物二聚体的带

[ 发自小木虫客户端 ]
天道酬勤
2楼2015-05-05 22:37:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2015-05-06 09:55:14
小于100bp的基本可以判断是引物二聚体,你的marker没标,你自己对着marker判断,但是第一张图有三个条带,中间那条应该不是markar,使用特异性高的Taq酶扩增试试

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
3楼2015-05-06 09:04:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

中间那条应该不是以内二聚体,说错了,刚刚走神了。。。
todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
4楼2015-05-06 09:05:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703化学338求调剂! +3 Zuhui0306 2026-03-26 3/150 2026-03-26 16:52 by 吞噬星空996
[考研] 一志愿北京化工大学材料与化工(085600)296求调剂 +9 稻妻小编 2026-03-26 9/450 2026-03-26 16:16 by 不吃魚的貓
[硕博家园] 北京林业大学硕导招生广告 +5 kongweilin 2026-03-26 7/350 2026-03-26 14:37 by mapenggao
[考研] 309求调剂 +4 gajsj 2026-03-25 5/250 2026-03-26 00:27 by Dyhoer
[考研] 材料与化工328分调剂 +6 。,。,。,。i 2026-03-23 6/300 2026-03-25 22:30 by 418490947
[考研] 一志愿中南大学化学学硕0703总分337求调剂 +7 niko- 2026-03-22 7/350 2026-03-25 20:14 by qingfeng258
[考研] 296求调剂 +4 汪!?! 2026-03-25 7/350 2026-03-25 16:41 by 汪!?!
[考研] 303求调剂 +6 元夕元 2026-03-20 7/350 2026-03-25 12:00 by edmund7
[考研] 化工专硕求调剂 +3 question挽风 2026-03-24 3/150 2026-03-24 18:48 by jhhcooi
[考研] 279分求调剂 一志愿211 +18 chaojifeixia 2026-03-19 20/1000 2026-03-24 10:34 by dolphin_ycj
[考研] 环境学硕288求调剂 +8 皮皮皮123456 2026-03-22 8/400 2026-03-23 23:47 by 热情沙漠
[考研] 一志愿国科过程所081700,274求调剂 +3 三水研0水立方 2026-03-23 3/150 2026-03-23 23:11 by MajorWen
[考研] 327求调剂 +5 prayer13 2026-03-23 5/250 2026-03-23 22:11 by 星空星月
[考研] 293求调剂 +3 涛涛Wjt 2026-03-22 5/250 2026-03-22 22:21 by jiangpengfei
[考研] 303求调剂 +5 安忆灵 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:46 by 素颜倾城1988
[考研] 一志愿华中科技大学071000,求调剂 +4 沿岸有贝壳6 2026-03-21 4/200 2026-03-22 07:21 by ilovexiaobin
[考研] 0703化学297求调剂 +3 Daisy☆ 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:45 by ColorlessPI
[考研] 279求调剂 +5 红衣隐官 2026-03-21 5/250 2026-03-21 14:59 by lature00
[考研] 求调剂 +3 @taotao 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:35 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 eation27 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:32 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见