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mRNA表达情况与Protein表达情况完全相反
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请各位大侠帮忙看一下小弟的预实验结果吧 比较诡异 在两种不同的组织AB中检测同一种基因X，上半部分是RT的数据，明显B组织中表达量较高，且具有极显著差异；而对该X基因的蛋白进行WB检测发现其在A组织中表达量较多（内参条带一致此处并未列出数据），可以确定RT primer的特异性很好，并且购买的抗体特异性很强，无杂带。请问各位针对这种情况我应该如何解释，接下来应该如何进行研究为何他们会出现这样的差异？ 万分感谢！  X求助.jpg |
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jackyoung
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【答案】应助回帖
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其实这种情况在实验中有遇到，有多种剪切形式的问题，有检测方法的问题，此处不妄断，只提思路，希望几个月之内看到你分析的原因，愿实验顺利！（如果问题解决了，或者有帮助，希望赏金币。） 发自小木虫Android客户端 |
4楼2015-09-11 01:34:07
lflffeng
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2楼2015-09-02 23:16:11
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【答案】应助回帖
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暂且假设结果没有问题，那么也就说明两个水平的调控并不一致，需要进一步分别确认:1.所检测到的mRNA水平是否真的高（完整性？引物特异不代表检测到的东西就是直接翻译蛋白的mRNA，有没有不完整片段？是否存在多种可变剪切形式等），可以用不同位置的引物，不同检测方法（如Northern杂交）确认，甚至不同的反转录方式（随机引物还是Oligo dT?）;2.蛋白是否真的高（是否是真正的翻译产物?是否是有活性的形式?） 可以结合其功能对应的表型来分析，间接反映蛋白水平变化。 发自小木虫Android客户端 |
3楼2015-09-11 01:29:50
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