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zhang183clue

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
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虫号: 2205558
注册: 2012-12-25
专业: 细胞呼吸与代谢

[求助] mRNA表达情况与Protein表达情况完全相反

请各位大侠帮忙看一下小弟的预实验结果吧比较诡异

在两种不同的组织AB中检测同一种基因X，上半部分是RT的数据，明显B组织中表达量较高，且具有极显著差异；而对该X基因的蛋白进行WB检测发现其在A组织中表达量较多（内参条带一致此处并未列出数据），可以确定RT primer的特异性很好，并且购买的抗体特异性很强，无杂带。请问各位针对这种情况我应该如何解释，接下来应该如何进行研究为何他们会出现这样的差异？

万分感谢！

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1楼 2015-04-29 11:35:09

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

jackyoung

新虫 (正式写手)

博学EPI: 1
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性别: GG
专业: 园艺学与植物营养学

【答案】应助回帖

暂且假设结果没有问题，那么也就说明两个水平的调控并不一致，需要进一步分别确认:1.所检测到的mRNA水平是否真的高（完整性？引物特异不代表检测到的东西就是直接翻译蛋白的mRNA，有没有不完整片段？是否存在多种可变剪切形式等），可以用不同位置的引物，不同检测方法（如Northern杂交）确认，甚至不同的反转录方式（随机引物还是Oligo dT?）;2.蛋白是否真的高（是否是真正的翻译产物?是否是有活性的形式?）可以结合其功能对应的表型来分析，间接反映蛋白水平变化。

发自小木虫Android客户端