应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助 基因一直突变的问题
181/2返回列表12下一页
查看: 1178  |  回复: 17
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

ZQS2013

铜虫 (初入文坛)

[求助] 求助 基因一直突变的问题已有2人参与

求助:  我说下我的问题   想把一段信号肽序列和一段基因序列连接到同一载体上  (基因就连接到信号肽后面 ) 我是分别连上去的   可拿到的克隆总是会出现一个碱基的缺失  一开始觉得有突变的可能   然后就一直做  都半年多了  拿到的克隆全部是有一个不同位点的碱基的缺失  缺失的位点有时候是信号肽  有的是基因的前100BP内的
奇怪的是我把测序正确的信号肽和基因切下来组合到一块时  又出现了新的突变位点   不知道是原因导致了这种结果    求虫友解惑
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼2015-04-27 20:58:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
ZQS2013: 金币+3 2015-04-28 10:04:17
1 楼主是否采用高保真酶？
2 出现突变位点是在测序结果的前100-200个碱基或最后部分碱基吗？如果是，那就是测序的问题，最好设计反向引物再测一下
赞一下(2人) 回复此楼
植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
2楼2015-04-28 09:23:32
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ZQS2013

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by starseacow at 2015-04-28 09:48:34
应该不至于...

  那可能的原因就是我的问题了
赞一下(2人) 回复此楼
8楼2015-04-28 09:53:32
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ZQS2013

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2015-04-28 09:23:32
1 楼主是否采用高保真酶？
2 出现突变位点是在测序结果的前100-200个碱基或最后部分碱基吗？如果是，那就是测序的问题，最好设计反向引物再测一下

用的是高保真的   其实让我奇怪的是   构建好的质粒中有信号肽测序没问题的  也有基因测序没问题的   我就切下来  组合在一起   就是又会发生新的突变   这应该不是测序的问题了吧
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2015-04-28 09:34:02
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ZQS2013

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by starseacow at 2015-04-28 09:37:11
照你这么说，我感觉是测序的问题，你用的哪家公司，用反向引物再测一下或者换家公司？...

原来一直是在华大科技测序的    试过在别家重测过   结果一样
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2015-04-28 09:40:50
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ZQS2013

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by starseacow at 2015-04-28 09:37:11
照你这么说，我感觉是测序的问题，你用的哪家公司，用反向引物再测一下或者换家公司？...

其实我想问(不知道说的对不对)   会不会和大肠杆菌的限制性修饰系统有关
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2015-04-28 09:44:46
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

山人lph

新虫 (初入文坛)
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 应助指数-1, 无应助 2015-04-29 18:40:41
我也想知道为什么。。。。
赞一下(1人) 回复此楼
战必胜，攻必克！
11楼2015-04-28 10:08:09
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

starseacow

专家顾问 (职业作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by ZQS2013 at 2015-04-28 09:34:02
用的是高保真的   其实让我奇怪的是   构建好的质粒中有信号肽测序没问题的  也有基因测序没问题的   我就切下来  组合在一起   就是又会发生新的突变   这应该不是测序的问题了吧...

照你这么说，我感觉是测序的问题，你用的哪家公司，用反向引物再测一下或者换家公司？
赞一下 回复此楼
植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
4楼2015-04-28 09:37:11
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

starseacow

专家顾问 (职业作家)
引用回帖:
6楼: Originally posted by ZQS2013 at 2015-04-28 09:44:46
其实我想问(不知道说的对不对)   会不会和大肠杆菌的限制性修饰系统有关...

应该不至于
回复此楼
植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
7楼2015-04-28 09:48:34
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yalier

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by ZQS2013 at 2015-04-28 09:34:02
用的是高保真的   其实让我奇怪的是   构建好的质粒中有信号肽测序没问题的  也有基因测序没问题的   我就切下来  组合在一起   就是又会发生新的突变   这应该不是测序的问题了吧...

9楼2015-04-28 10:04:37
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yalier

新虫 (初入文坛)
换个信号肽
回复此楼
10楼2015-04-28 10:07:12
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 ZQS2013 的主题更新
181/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭