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这样的免疫印迹图片可以能用于发表论文吗？ 已有3人参与
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如图，上边一排条带是目的基因蛋白，下边一排条带是内参蛋白，没有Marker，内参总是连在一起（减少上样量也未解决），目的蛋白和内参蛋白是分开曝光的，这样的图片能发表论文吗？有经验的同志帮忙回答下，谢谢 12333.jpg |
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2楼2015-04-23 16:07:57
董博士
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【答案】应助回帖
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可以用来发文章的，现在的western blot 结果一般都要求附上相对表达值（灰度扫描）； 对于这种情况，减少上样量会有帮助的，看楼主的片子，目的蛋白也挺强的，上样量减少到三分之一都可以，或者降低GAPDH的抗体浓度，缩短曝光时间，如果片子放上去就拿出来还是很强，那就建议两张甚至3张片子叠加一起压片，最短时间显影，最上面那张一定不会这么强了，另建议注意配胶（玻璃板要绝对干净）和电泳的细节，上样体积要一致（不一致的用1×loading补齐） |
3楼2015-04-23 16:14:03
4楼2015-04-23 16:47:15
5楼2015-04-23 16:50:02
董博士
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6楼2015-04-24 09:19:14
7楼2015-04-24 10:06:54
【答案】应助回帖
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没问题，可以用于发表 要是不能分开曝光，那在一个blot上同时看七八个蛋白根本没法做了 我最多一次要用6种不同的抗体来检测，其中两个抗体的目的蛋白分子量还几乎一样，需要把第一个抗体洗脱下来再和第二个抗体孵育 有时候还不得不把blot沿着marker水平切成三份，分别和三种不同抗体过夜孵育，marker早就切没了 内参连在一起也没有大碍，一般分子量小的蛋白都会有点扩散，正常现象 至于marker有没有也没关系，不是每个实验室都有可以显色marker的试剂和设备的 |
8楼2015-04-24 22:37:23
