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瓜尔佳氏鱼鱼

银虫 (小有名气)

[求助] 质粒提取 已有2人参与

我现在遇到了一个情况,就是质粒提取出来之后条带亮度没有参考文献中的亮,怎么才能提高亮度?我增加了菌液了量,增加了跑胶的点样量,都不行。
此外我开始制胶的时候,就直接将EB加进去了,我老师说应该跑完胶之后染色,但是效果是一样的,不亮,应该怎么解决?我是用天根的提质粒的试剂盒提的。
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过上等人的生活,尽中等人的劳力,享下等人的情欲。
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瓜尔佳氏鱼鱼

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by jacobbai at 2015-04-20 18:45:06
loading buffer跟质粒是5:1(质粒浓度大概100ng/ul上下),EB是制胶时候加的,待胶不是很烫手的时候加入即可。...

好的,我试试,6乘的loading buffer:质粒=5:1,和平时PCR的比例是反着的,对吧?
过上等人的生活,尽中等人的劳力,享下等人的情欲。
5楼2015-04-20 19:03:30
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jacobbai

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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瓜尔佳氏鱼鱼: 金币+2, 有帮助 2015-04-20 18:22:08
瓜尔佳氏鱼鱼: 金币+1, 有帮助 2015-04-20 19:04:02
loading buffer的量是多少,可以提高loading buffer的量
2楼2015-04-20 18:06:07
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瓜尔佳氏鱼鱼

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jacobbai at 2015-04-20 18:06:07
loading buffer的量是多少,可以提高loading buffer的量

没有注意buffer的量,就是在手套上点了一滴,然后5ul一混的;
那么我的EB染色是应该制胶的时候就加入,还是跑完胶染色呢?
过上等人的生活,尽中等人的劳力,享下等人的情欲。
3楼2015-04-20 18:21:56
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jacobbai

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 瓜尔佳氏鱼鱼 at 2015-04-20 18:21:56
没有注意buffer的量,就是在手套上点了一滴,然后5ul一混的;
那么我的EB染色是应该制胶的时候就加入,还是跑完胶染色呢?...

loading buffer跟质粒是5:1(质粒浓度大概100ng/ul上下),EB是制胶时候加的,待胶不是很烫手的时候加入即可。
4楼2015-04-20 18:45:06
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