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质粒提取 已有2人参与
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我现在遇到了一个情况，就是质粒提取出来之后条带亮度没有参考文献中的亮，怎么才能提高亮度？我增加了菌液了量，增加了跑胶的点样量，都不行。 此外我开始制胶的时候，就直接将EB加进去了，我老师说应该跑完胶之后染色，但是效果是一样的，不亮，应该怎么解决？我是用天根的提质粒的试剂盒提的。 |
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看看你们的讨论，有点搞笑吧。 质粒电泳 条带不亮 最根本的原因是什么？ 我告诉你，是因为你提取的质粒质量比较差！从质粒电泳图上判断质量好与坏取决于质粒超螺旋的那条带（看教科书吧）！ 跟EB先加或后染色关系不重要，只要确定EB发挥作用并且同时上样的marker条带正常，就可以！ 跟loding buffer加多加少也没多大关系，要理解该buffer的作用！加多了充其量把你的样品稀释了，只要你全点上，根本没问题！ 你想想marker的那几十ng的条带就可以那么亮！ 解决方法… 重新提取质粒，有钱简单的方法，用QIAGEN提一次，取200ng电泳你在看看是不是亮爆了！ 没钱麻烦点的方法，把你的质粒用酚氯仿抽提然后再乙醇+NaAC纯化，然后溶解，取200ng电泳看看 [ 发自小木虫客户端 ] |
13楼2015-04-22 08:30:41
2楼2015-04-20 18:06:07
3楼2015-04-20 18:21:56
4楼2015-04-20 18:45:06