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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 学术交流， 有关目的片段与载体连接 转化 遇到问题，急需帮助，谢谢！
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gengxin60
祝福
11楼2015-04-20 20:38:32
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阿Q~~

至尊木虫 (文坛精英)
路过的看了一下，帮顶，祝福好运！~~~~~~~~~~~~~~~~~~
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自强不息，厚德载物；独立精神，自由思想。
12楼2015-04-20 20:51:00
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mzhyan

至尊木虫 (文坛精英)
blessing
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13楼2015-04-20 21:14:56
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wuwenmei

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
还没有做到这步，估计也快了，
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下雨天就算没有伞，我也要学会努力奔跑！
14楼2015-04-20 21:16:34
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johnson168
15楼2015-04-20 21:24:59
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lvyongfeng
16楼2015-04-20 21:36:04
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星空0961

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by lucklizhen at 2015-04-19 20:48:37
Kpn1和BamH1用的哪个公司的啊？NEB 高保真的是相同的buffer,可以做双酶切。然后胶回收，等到目的条带离胶边缘还有一厘米的时候停电，切胶回收。你这个实验用RED/et重组技术很容易。可以上网搜一下red/et.好运。

Kpn1是NEB，BamH1是宝生物的，可以混合酶切吗，效果好吗
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17楼2015-04-20 22:08:03
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星空0961

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 墨尔本机器 at 2015-04-20 19:58:27
就是没除干净啊，换换采用PCR的方法纯化，你300的目的片段用PCR获得后与7700过夜连接，转化图板。

当时设计引物时，片段包含该酶切位点，如果再设计引物的话，太浪费时间了
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18楼2015-04-20 22:12:50
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星空0961

新虫 (小有名气)
引用回帖:
17楼: Originally posted by 星空0961 at 2015-04-20 22:08:03
Kpn1是NEB，BamH1是宝生物的，可以混合酶切吗，效果好吗...

跑电泳跑一半就停了，要不然就跑没了，同时谢谢您的建议！谢谢！
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19楼2015-04-20 22:15:46
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星空0961

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by lucklizhen at 2015-04-19 20:48:37
Kpn1和BamH1用的哪个公司的啊？NEB 高保真的是相同的buffer,可以做双酶切。然后胶回收，等到目的条带离胶边缘还有一厘米的时候停电，切胶回收。你这个实验用RED/et重组技术很容易。可以上网搜一下red/et.好运。

跑电泳跑一半就停了，要不然就跑没了，同时谢谢您的建议！谢谢！
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20楼2015-04-20 22:22:45
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