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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 利福平培养基摇农杆菌菌液的颜色
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shiliyusly

新虫 (小有名气)

[求助] 利福平培养基摇农杆菌菌液的颜色 已有3人参与

大家好！我刚接触农杆菌，最近想自己做些农杆菌感受态（GV3101），但最近我用含利福平的LB和YEP摇农杆菌，菌液颜色差异很大，甚是困惑。
1 我的利福平是50mg/ml（DMSO溶解，过滤膜，EP管分装-20度保存），1L培养基加1ml，我发现刚加进去的时候整瓶培养基是金黄色，过几个小时后就变成酒红色了，这是什么原因呢？正常吗？
2 我挑农杆菌单菌落到5ml 含利福平LB过夜摇，然后取2ml到50ml利福平LB摇4h，出现2种颜色（如下图）
  图中1加入的利福平是1个EP管已用过2,3次的，即反复冻融过的，培养基加入利福平第二天颜色才变红色；测OD值为1左右，底部有白白的沉淀
  图中2加入的利福平是新的一管，40度水浴解冻，培养基刚加入是黄色，2,3个小时后变红色（图中3）
      
关于正常的颜色应该是如何我真不知道了，麻烦哪位高手帮我解答下，感激不尽了

利福平培养基摇农杆菌菌液的颜色
IMG20150404164514.jpg
利福平培养基摇农杆菌菌液的颜色-1
IMG20150404164315.jpg
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1楼 2015-04-04 17:18:59
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yantaowang

金虫 (正式写手)

奋斗小青年

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
shiliyusly: 金币+3 2015-04-05 09:14:34
我师兄每次摇农杆菌都是从酒红色变成果粒橙的颜色就差不多了。。。。
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我生命里的温暖就那么多......全部给了你！
2楼2015-04-04 18:26:51
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shiliyusly

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yantaowang at 2015-04-04 18:26:51
我师兄每次摇农杆菌都是从酒红色变成果粒橙的颜色就差不多了。。。。

谢谢你
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3楼2015-04-05 09:14:26
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卡维斯

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
shiliyusly: 金币+3 2015-04-07 16:43:02
通常我们使用的rif即使配制50mg/ml，实际使用时浓度也不够，会有少许沉淀，我一般都是在冰盒上解冻，用前摇匀，比例1：1000的加，有时会增加筛选压多加一些，一般加入是酒红色，摇至橙色、有混浊感时就可以使用了。
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4楼2015-04-06 11:11:36
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lwk5716

铁杆木虫 (正式写手)
图1底部有白白的沉淀会不会是死亡的菌体，我也遇到过，也很困惑，求解。
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5楼2015-04-07 11:39:11
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shiliyusly

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 卡维斯 at 2015-04-06 11:11:36
通常我们使用的rif即使配制50mg/ml，实际使用时浓度也不够，会有少许沉淀，我一般都是在冰盒上解冻，用前摇匀，比例1：1000的加，有时会增加筛选压多加一些，一般加入是酒红色，摇至橙色、有混浊感时就可以使用了。

要在冰盒解冻吗？那会很慢吧，我直接40度水浴了，想着加的时候培养基基本也是这个温度，没多想
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6楼2015-04-07 16:42:54
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shiliyusly

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by lwk5716 at 2015-04-07 11:39:11
图1底部有白白的沉淀会不会是死亡的菌体，我也遇到过，也很困惑，求解。

有可能是浓度高了吧，不清楚呢。你后来没有这种沉淀了吗？如果后来没有也算不正常了哦
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7楼2015-04-07 16:43:53
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lwk5716

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by shiliyusly at 2015-04-07 16:43:53
有可能是浓度高了吧，不清楚呢。你后来没有这种沉淀了吗？如果后来没有也算不正常了哦...

嗯，有可能是浓度高的，不过有时候我在摇菌的时候会有絮状物，有可能是摇菌的时间长了。
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8楼2015-04-07 21:26:21
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xoxo大蝴蝶

新虫 (初入文坛)
楼主 我想问一下楼主有没有发现放了利福平的培养基 放置一段时间也会变酒红色

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9楼2016-07-10 19:42:01
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杨梅熟了

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by xoxo大蝴蝶 at 2016-07-10 19:42:01
楼主 我想问一下楼主有没有发现放了利福平的培养基 放置一段时间也会变酒红色

时间放久了确实会变颜色

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10楼2016-07-11 00:03:07
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