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飞走的希望

木虫 (著名写手)

笑的太痴颠

[求助] QRT-PCR内参设置问题已有1人参与

我想请教一下,在做QRT-PCR时,引物内参需要设置几个?一个样品对应一个内参吗?我的样品比较多,如果一个样品对应一个的话,内参也比较多啊,还有一个问题就是我查到了大鼠其他组织的引物,我能拿过来直接在我自己的组织里用吗?新手,谢谢指点
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hanxiaominhu

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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飞走的希望: 金币+2 2015-04-03 22:43:36
QRT-PCR内参基因一般选一个基因就够了,每个样P一次,偶尔有用双内参基因的。一般来说尽量选择在自己的实验条件下表达稳定的内参基因,所以,你如果直接用别的组织的引物很有可能表达水平没有达到要求,要不做个预实验看看,要不还是选择和你实验条件一致的基因。
2楼2015-04-03 08:05:54
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飞走的希望

木虫 (著名写手)

笑的太痴颠

引用回帖:
2楼: Originally posted by hanxiaominhu at 2015-04-03 08:05:54
QRT-PCR内参基因一般选一个基因就够了,每个样P一次,偶尔有用双内参基因的。一般来说尽量选择在自己的实验条件下表达稳定的内参基因,所以,你如果直接用别的组织的引物很有可能表达水平没有达到要求,要不做个预实 ...

自己合成的引物,筛选太慢,我是想着,找一个别人发表过的引物,拿来筛选一下,看看,也算又有目标。
3楼2015-04-03 22:43:27
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预估预估

新虫 (正式写手)

4楼2018-02-01 23:38:58
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