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JNVBNC

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
提高一下引物浓度吧 20微升体系里我都加0.8微升的引物
但是16S应该很容易扩增啊
11楼2015-04-02 09:22:43
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199006287956

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
感觉是DNA的问题,我出现过这种状况,然后重提了DNA就好了。然后就是DNA 浓度不要太高。

[ 发自小木虫客户端 ]
追求不惜,奋斗不息
12楼2015-04-02 10:07:02
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虫儿飞不飞

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
阳性对照、阴性对照都没有东西,PCR是失败的,从各方面--体系、退火温度等。
应该检查,模版、聚合酶,至于退火温度你可以设置一个梯度。
整个排查下来,应该会成功的。
朝闻道,吃酸粥
13楼2015-04-02 10:52:28
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yuman0709

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
阳性对照没有条带,说明体系可能不对,20ul的体系,模板的浓度太高了吧,若模板条带很亮,应适当较少,我20ul的体系用1ul或0.5ul,还有在加样时,酶是否混匀等细小问题
14楼2015-04-02 15:09:52
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