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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 跑胶跑不出来
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金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
提高一下引物浓度吧 20微升体系里我都加0.8微升的引物
但是16S应该很容易扩增啊
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11楼2015-04-02 09:22:43
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199006287956

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
感觉是DNA的问题，我出现过这种状况，然后重提了DNA就好了。然后就是DNA 浓度不要太高。

[ 发自小木虫客户端 ]
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追求不惜，奋斗不息
12楼2015-04-02 10:07:02
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虫儿飞不飞

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
阳性对照、阴性对照都没有东西，PCR是失败的，从各方面--体系、退火温度等。
应该检查，模版、聚合酶，至于退火温度你可以设置一个梯度。
整个排查下来，应该会成功的。
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朝闻道，吃酸粥
13楼2015-04-02 10:52:28
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yuman0709

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
阳性对照没有条带，说明体系可能不对，20ul的体系，模板的浓度太高了吧，若模板条带很亮，应适当较少，我20ul的体系用1ul或0.5ul，还有在加样时，酶是否混匀等细小问题
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14楼2015-04-02 15:09:52
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