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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 连接载体相关
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781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
20楼: Originally posted by 明太鱼 at 2015-03-30 18:03:53
是实验室改造的载体，上面的单酶切位点只有BamHIXbaISpeIPstISacIEcoRI,具体他们之间间隔多少我得再问问...

不一定要单酶切位点，位点好的话有两个酶切位点的也可以，只要切够不影响连接就行了。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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采菊东篱下，悠然见南山。
21楼2015-03-30 18:07:28
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781055707

木虫 (著名写手)
引用回帖:
21楼: Originally posted by 781055707 at 2015-03-30 18:07:28
不一定要单酶切位点，位点好的话有两个酶切位点的也可以，只要切够不影响连接就行了。
...

切后不影响表达就行了。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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采菊东篱下，悠然见南山。
22楼2015-03-30 18:08:11
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明太鱼

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
21楼: Originally posted by 781055707 at 2015-03-30 18:07:28
不一定要单酶切位点，位点好的话有两个酶切位点的也可以，只要切够不影响连接就行了。
...

那样的话载体不切碎了吗
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23楼2015-03-30 19:17:12
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yuman0709

铁虫 (初入文坛)
楼主怎么解决的啊？我的也是，几乎都是假阳性，各个步骤都验证了，不知问题在哪？连接酶也是新的，就是不知是什么原因，很纠结
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24楼2015-04-02 09:56:38
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明太鱼

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
24楼: Originally posted by yuman0709 at 2015-04-02 09:56:38
楼主怎么解决的啊？我的也是，几乎都是假阳性，各个步骤都验证了，不知问题在哪？连接酶也是新的，就是不知是什么原因，很纠结

换了载体重新选的酶切位点刚开始重新做
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25楼2015-04-02 16:14:28
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明太鱼

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
23楼: Originally posted by 明太鱼 at 2015-03-30 19:17:12
那样的话载体不切碎了吗...

谢谢我决定换载体重选酶切位点了
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26楼2015-04-02 16:15:25
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