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pengjie889

新虫 (初入文坛)

[交流] 求助:总皂苷的紫外

大家帮帮忙,我今天做总皂苷的紫外,用的是香草醛-冰醋酸,后加高氯酸,70度水浴20分钟显色,发现空白是蓝色的,标准品和样品都变成黑色的了,而且颜色很浓,很深,请问这是怎么回事?

[ Last edited by pengjie889 on 2008-6-24 at 19:26 ]
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pengjie889

新虫 (初入文坛)

谢谢你的指导,我今天又试了,发现加入的时候空白还是淡黄色的,但在60度水浴里放置10分钟左右,就变成红色的了,最后再用5毫升冰醋酸稀释,竟然变成淡蓝色的了,所用仪器都换了,重新洗过的,冰醋酸也换了,香草醛也换了,请问这是怎么回事。
3楼2008-06-25 16:27:00
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huobao_zhang

金虫 (小有名气)


karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教!
我做过总皂苷的紫外测定,有几点跟你交流一下
1.你用的70度水浴20分钟,我当时做的条件是60度水浴15分钟,首先确定你的条件是不是太剧烈了
2.要确定你所用的样品容器(试管)是不是刷干净了,里面有皂苷的话是会被污染了,我记得,空白加香草醛-冰醋酸,和高氯酸之后颜色为淡黄色,水浴加热反应后也是这个颜色,没变的,你所谓的空白是蓝色的,是反应前就这颜色还是反应后才变成这个颜色?
3.你说标准品和样品都变成黑色了,这是皂苷类成分浓度太高的缘故,标准品浓度在100ug的时候,它的颜色应为紫色的很漂亮的颜色,并且吸收值也在正常范围内。
你再试一下,如果还有问题,可以跟我联系
2楼2008-06-24 23:12:49
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jsucqh98

金虫 (正式写手)

金虫草

检查所用试剂是否过期,同时浓度是否标定过。
4楼2008-06-25 16:58:05
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