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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 农林 » 畜牧兽医 » 为什么测定琥珀酸脱氢酶的活性的时候，是将细胞中线粒体提取出来破碎后再测定？
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linxiqi

新虫 (正式写手)

[求助] 为什么测定琥珀酸脱氢酶的活性的时候，是将细胞中线粒体提取出来破碎后再测定？

为什么测定琥珀酸脱氢酶的活性的时候，是将细胞中线粒体提取出来破碎后再测定，而不是直接测定呢？求原理
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活在当下
1楼2015-03-19 22:50:44
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

linxiqi

新虫 (正式写手)
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4楼: Originally posted by 静心等待 at 2015-03-20 07:53:26
琥珀酸脱氢酶是结合在线粒体膜上的，要破碎是因为琥珀酸氧化会向膜内膜外泵质子，从而增大质子梯度，质子梯度会反馈抑制呼吸电子酶的活性，所以要破碎或者加解偶联剂来打破跨膜质子梯度

按层主的意思，破碎线粒体后测酶活性可以防止抑制呼吸电子酶的活性，那破碎后组织中SDH酶活性应该低于组织线粒体中SDH酶活性，但沈明华学者写的《不同地区牦牛心肌、骨骼肌CCO、SDH活性测定》这篇文献中泽库牦牛心肌、骨骼肌组织SDH活性均高于其线粒体中SDH的活性,且差异极显著(P<0.01);这篇文献中组织中SDH酶活性显著高于线粒体中SDH活性，该如何理解？？？求解？？？？
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活在当下
5楼2015-03-20 09:23:21
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静心等待

银虫 (正式写手)
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7楼: Originally posted by linxiqi at 2015-03-20 16:48:54
明白，那再问你一个问题，酶活性与酶基因mRNA表达量之间的可能关系有哪些？...

基因水平，蛋白水平，还有活性不一定是正相关，酶活是最直接的，其他的只能做辅助，因为表达高，酶量大不一定活性就高
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linxiqi
8楼2015-03-20 18:31:28
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Buckings

铁杆木虫 (正式写手)

至尊木虫
顶起，别沉了。。。。。

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2楼2015-03-19 23:45:18
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linxiqi

新虫 (正式写手)
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2楼: Originally posted by Buckings at 2015-03-19 23:45:18
顶起，别沉了。。。。。

5555

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活在当下
3楼2015-03-19 23:46:22
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静心等待

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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linxiqi: 金币+5, ★有帮助, 还想问一个问题？ 2015-03-20 09:11:43
琥珀酸脱氢酶是结合在线粒体膜上的，要破碎是因为琥珀酸氧化会向膜内膜外泵质子，从而增大质子梯度，质子梯度会反馈抑制呼吸电子酶的活性，所以要破碎或者加解偶联剂来打破跨膜质子梯度
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4楼2015-03-20 07:53:26
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静心等待

银虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by linxiqi at 2015-03-20 09:23:21
按层主的意思，破碎线粒体后测酶活性可以防止抑制呼吸电子酶的活性，那破碎后组织中SDH酶活性应该低于组织线粒体中SDH酶活性，但沈明华学者写的《不同地区牦牛心肌、骨骼肌CCO、SDH活性测定》这篇文献中泽库牦牛心 ...

理论上，在其他条件都不变的情况下，解偶联后会促进酶活，而且不容易受胞内其他物质的干扰，应该该是比较准确的。你说的这个文章我没看过，我也不是做动物的，但是个人认为，这样的比较不是很有意义，而且方法上是否有问题，活性损失程度有多大都不知道。首先要保证自己方法准确，得到正确的结果，然后去解释就行
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6楼2015-03-20 15:25:55
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linxiqi

新虫 (正式写手)
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6楼: Originally posted by 静心等待 at 2015-03-20 15:25:55
理论上，在其他条件都不变的情况下，解偶联后会促进酶活，而且不容易受胞内其他物质的干扰，应该该是比较准确的。你说的这个文章我没看过，我也不是做动物的，但是个人认为，这样的比较不是很有意义，而且方法上是 ...

明白，那再问你一个问题，酶活性与酶基因mRNA表达量之间的可能关系有哪些？
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活在当下
7楼2015-03-20 16:48:54
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linxiqi

新虫 (正式写手)
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8楼: Originally posted by 静心等待 at 2015-03-20 18:31:28
基因水平，蛋白水平，还有活性不一定是正相关，酶活是最直接的，其他的只能做辅助，因为表达高，酶量大不一定活性就高...

谢谢你，茅塞顿开，那测活性是在测什么？我一直以为测活性是在测酶量？期待您的答复！！！
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活在当下
9楼2015-03-20 19:19:17
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信心百倍1234
dui
10楼2015-04-15 21:42:00
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