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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR产物跑胶老是拖尾，这是怎么回事？
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sci1988

银虫 (小有名气)

[求助] PCR产物跑胶老是拖尾，这是怎么回事？ 已有6人参与

产物跑0.8%的胶时，老是出现拖尾问题，跑胶时电压100v，大家看看什么情况？

PCR产物跑胶老是拖尾，这是怎么回事？
Administrator 2015-03-19 15 时 09 分.jpg
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1楼 2015-03-19 15:31:20
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781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
拖尾可以换个试剂试试，但主要的是引物没批出来。
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采菊东篱下，悠然见南山。
2楼2015-03-19 15:54:33
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biolinker

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个不是跑胶的问题，主要是你的引物和PCR程序的问题。
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3楼2015-03-19 16:18:30
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sci1988

银虫 (小有名气)
这个主要pcr的片段为约5kb，中间也是有片段的，不知道咋拖这么多
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4楼2015-03-19 16:25:00
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
5kb的模板，不小，对于引物来说设计的要求更高了一些，但主要还是用酶吧，普通的酶应该扩不出来，一般的化学修饰热启动酶效果很好小于8kb一下都能够很好的扩增http://www.detaibio.com/relia-hotstart-polymerase.html
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todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
5楼2015-03-19 17:07:09
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素锦流年1991

新虫 (初入文坛)
应该是PCR的问题，从图中可看出marker跑的很好，应该不是电泳的问题，建议改变PCR条件，重新进行PCR,
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6楼2015-03-19 18:22:33
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老脸挂不住

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

换一对引物看看吧，我当初拖尾的现象就是换了引物才解决掉的
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我要这天，再遮不住我眼要这地，再埋不了我心要这众生，都明白我意要那诸佛，都烟消云散
7楼2015-03-22 21:48:31
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小妖的语言

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

maker也能被跑成这样人才了   条带还竟然歪   胶没做好，PCR体系有问题 注意退火温度，DNA提取的质量可能不好，引物设计有问题。
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8楼2015-05-28 16:18:31
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没想好名字

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

首先，你电压太低了，建议改为120V或130V试试，其次，你压根就没有目的条带，自己好好调整下条件或换下引物。
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9楼2015-05-29 12:54:54
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cocowant

新虫 (初入文坛)
楼主最后换引物做出来了吗？我也出现了这种问题，但是别人做能做出来。
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10楼2022-04-07 14:17:09
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