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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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ZRFZYY

银虫 (正式写手)

[求助] 血清蛋白双向电泳

第一次做双向电泳，样品为绵羊血清（未去白蛋白、IGg），上样量240ug,IPG胶条是GE公司的：13cm,PH 3-10
等电聚焦条件：被动水化 15h
50V 2h
300V 3h
1000V 3h
3000V 3h
8000V 3h
8000V 80000vh
500v 10v
SDS-page条件：15mA/胶条，30min;45mA/胶条，至溴酚蓝跑至胶下沿。
不知道为什么会没有蛋白点，操作是按照GE公司双向电泳操作手册做的，希望知道原因的大侠帮助解释一下，不胜感谢！

血清蛋白双向电泳
20150317_155447.jpg
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用心做事
1楼 2015-03-18 11:29:05
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haze12344

银虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by ZRFZYY at 2015-05-14 10:40:14
水化是在空调房20℃进行的，加了水化液的样品没有跑过SDS-PAGE,但是未水化的跑过，不能加了水化液蛋白就不在了吧...

我之前试过一次，加了水化液之后没有在室温中摇一个小时，就上样，结果点就很小，结果不好，但是我的样品是沉淀。
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生物你好
12楼2015-05-14 11:45:01
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haze12344

银虫 (小有名气)
你的样品有没有跑过普通的SDS-PAGE？可以先取10μL跑个看看有没有条带
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生物你好
2楼2015-04-17 15:43:50
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ZRFZYY

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by haze12344 at 2015-04-17 15:43:50
你的样品有没有跑过普通的SDS-PAGE？可以先取10μL跑个看看有没有条带

跑过，有的，条带很清楚
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用心做事
3楼2015-05-11 13:00:09
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haze12344

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by ZRFZYY at 2015-05-11 13:00:09
跑过，有的，条带很清楚...

那你做的时候电压能上到8000v么？
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生物你好
4楼2015-05-11 15:19:43
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