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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » DNA琼脂糖凝胶电泳图中的问题
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weneedaction

新虫 (小有名气)

[交流] DNA琼脂糖凝胶电泳图中的问题

从大肠杆菌SW102菌株中提取质粒pAL1112 (43712bp)后，进行酶切并跑电泳。
每次电泳图中都有一堆小片段很亮的核酸，不确定那是什么？   我用的Qiagene miniprep kit 提取的。Buffer 里面 加了RNA酶。
另外，为什么亮带不平整呢？

DNA琼脂糖凝胶电泳图中的问题
XY 2 2015-03-17 16hr 35min.jpg
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1楼 2015-03-17 17:43:35
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lavender_li

银虫 (小有名气)
★
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marker都跑成这样，多半胶有问题。
而且你这图放反了吧。下面那一排是上样孔吧。电泳的方向是你现在这个图的从下到上，所以上面那一团亮亮的应该是你PCR产物里面的东西。
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8楼2015-03-18 18:15:23
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五维度的爱

金虫 (小有名气)
★
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下面亮的是RNA污染，胶跑成这样：1.胶或电泳液的问题；2.胶中所加染料的问题
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9楼2015-03-19 15:03:13
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普通回帖

applecandy

新虫 (初入文坛)
★
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从Marker看，应该是电泳液或胶出了问题，建议用新的电泳液，最好借用其他实验室的电泳液试试看。
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2楼2015-03-17 20:41:37
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hkj710

木虫 (小有名气)
★
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个人感觉，样品不是很干净，最下面的那条亮带可能是RNA，吸附走大量的EB，导致你的目标条带不是很清晰。胶配置好像浓度不一
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3楼2015-03-18 05:04:22
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庚晨绮梦

银虫 (小有名气)
电流，电压多少
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fighting
4楼2015-03-18 09:03:23
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墨尔本机器

金虫 (小有名气)
★
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最上面的可能是蛋白残留。
条带弯曲是你的胶以及缓冲液的问题，更换新的应该就没问题了。
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5楼2015-03-18 17:00:49
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kuaile5420

专家顾问 (著名写手)
★
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亲，看marker你的胶出问题了，配的时候一定是产生气泡了。
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坚持到底就是胜利！
6楼2015-03-18 17:04:58
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aotoulan

禁虫 (小有名气)
★
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7楼2015-03-18 17:05:41
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weneedaction

新虫 (小有名气)
我又做了一次，这次为什么会拖尾这么严重。Marker没有拖尾。
DNA琼脂糖凝胶电泳图中的问题-1
XY 2015-03-19.jpg
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10楼2015-03-19 19:50:12
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